第一部分大鼠海馬神經(jīng)干細胞體外培養(yǎng)及鑒定目的:采用新生1~3天的Sprague-Dawley（SD）大鼠,提取其海馬神經(jīng)干細胞,進行傳代培養(yǎng)及多向分化鑒定,為下一步實驗提供神經(jīng)干細胞來源。方法:取新生1~3天的Sprague-Dawley大鼠,分離海馬制成細胞懸液,接種于25cm2培養(yǎng)瓶中,放入37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),通過機械吹打結合Accutase消化的方法傳代,逐步純化神經(jīng)干細胞。倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),通過免疫熒光染色對神經(jīng)干細胞及其多向分化進行鑒定。結果:成功分離培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)干細胞,神經(jīng)干細胞呈球形生長,折光性較好,隨著傳代次數(shù)的增加,細胞進一步得到純化;免疫熒光染色顯示培養(yǎng)的細胞巢蛋白（Nestine）染色均為陽性,神經(jīng)干細胞誘導分化7天后膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和β-微管蛋白III（β-tubulin III）免疫染色陽性。結論:從新生乳大鼠的海馬中可提取原代神經(jīng)干細胞,通過傳代的培養(yǎng)方法可獲得較高純度神經(jīng)干細胞,神經(jīng)干細胞具有多向分化潛能,可以向神經(jīng)元和星形膠質細胞分化。第二部分神經(jīng)干細胞分... 

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
實驗材料
第一部分 大鼠海馬神經(jīng)干細胞的體外培養(yǎng)及鑒定
    1.材料和方法
    2.結果
    3.討論
第二部分 神經(jīng)干細胞分化成熟過程中PTEN的表達及其意義
    1.材料和方法
    2.結果
    3.討論
第三部分 抑制PTEN對神經(jīng)干細胞分化成熟后軸突生長的影響
    1.材料和方法
    2.結果
    3.討論
全文總結
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]PTEN,a general negative regulator of cyclin D expression[J]. Eirong Diao~1 Ye-Guang Chen ~1State Key Laboratory of Biomembrane and Membrane Biotechnology,Department of Biological Sciences and Biotechnology Tsing-hua Universiry,Beijing 100084,China.  Cell Research. 2007(04)



本文編號：3696985