第一部分大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及鑒定目的:采用新生1~3天的Sprague-Dawley（SD）大鼠,提取其海馬神經(jīng)干細(xì)胞,進(jìn)行傳代培養(yǎng)及多向分化鑒定,為下一步實(shí)驗(yàn)提供神經(jīng)干細(xì)胞來源。方法:取新生1~3天的Sprague-Dawley大鼠,分離海馬制成細(xì)胞懸液,接種于25cm2培養(yǎng)瓶中,放入37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),通過機(jī)械吹打結(jié)合Accutase消化的方法傳代,逐步純化神經(jīng)干細(xì)胞。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),通過免疫熒光染色對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞及其多向分化進(jìn)行鑒定。結(jié)果:成功分離培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞呈球形生長(zhǎng),折光性較好,隨著傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞進(jìn)一步得到純化;免疫熒光染色顯示培養(yǎng)的細(xì)胞巢蛋白（Nestine）染色均為陽性,神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化7天后膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和β-微管蛋白III（β-tubulin III）免疫染色陽性。結(jié)論:從新生乳大鼠的海馬中可提取原代神經(jīng)干細(xì)胞,通過傳代的培養(yǎng)方法可獲得較高純度神經(jīng)干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞具有多向分化潛能,可以向神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞分化。第二部分神經(jīng)干細(xì)胞分... 

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)材料
第一部分 大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第二部分 神經(jīng)干細(xì)胞分化成熟過程中PTEN的表達(dá)及其意義
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
第三部分 抑制PTEN對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化成熟后軸突生長(zhǎng)的影響
    1.材料和方法
    2.結(jié)果
    3.討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PTEN,a general negative regulator of cyclin D expression[J]. Eirong Diao~1 Ye-Guang Chen ~1State Key Laboratory of Biomembrane and Membrane Biotechnology,Department of Biological Sciences and Biotechnology Tsing-hua Universiry,Beijing 100084,China.  Cell Research. 2007(04)



本文編號(hào)：3696985