目的：研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）尾靜脈移植對(duì)大鼠缺血性腦損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)的影響,并探討其可能的治療機(jī)制,為缺血性腦血管病的臨床治療提供更多有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和方法。方法：用密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選法分離、培養(yǎng)hUC-MSCs,移植前以10mg/L的BrdU進(jìn)行標(biāo)記。采用改良線栓法制作SD大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型,以TTC法判斷腦缺血的部位和范圍。根據(jù)Zea Longa神經(jīng)功能缺損評(píng)分將符合標(biāo)準(zhǔn)的80只腦缺血模型大鼠隨機(jī)分為3組（移植A組、移植B組、模型組）。移植A組在造模后7天通過尾靜脈方法將BrdU標(biāo)記的1x106個(gè)hUC-MSCs移植入大鼠體內(nèi),移植B組在造模后14天通過尾靜脈移植同等劑量的hUC-MSCs,模型組不作處理。在移植后第7,14,21,28,35,42,49,56天采用mNSS神經(jīng)功能損傷程度評(píng)分法檢測(cè)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復(fù)情況。移植后第3天分批取大鼠腦組織行免疫組化染色觀察CDllb、MPO陽性細(xì)胞。移植后第60天觀察移植后hUC-MSCs在大鼠腦內(nèi)存活及分化情況：Brdu+Nestin、Brdu+MAP-2、 Brdu+GFAP、Brdu+FⅧ、Brd... 

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
    研究背景
    研究目的、方法
一、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定及標(biāo)記
    1.1.對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑及儀器設(shè)備
            1.1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀
        1.1.2
            1.1.2.1 hUC-MSCs的分離和原代培養(yǎng)
            1.1.2.2 hUC-MSCs的傳代培養(yǎng)與擴(kuò)增
        1.1.3 hUC-MSCs細(xì)胞表型檢測(cè)
        1.1.4 BrdU標(biāo)記
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 hUC-MSCs細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        1.2.2 hUC-MSCs細(xì)胞免疫表型檢測(cè)
    1.3 討論
        1.3.1 MSCs培養(yǎng)材料來源的選擇
        1.3.2 hUC-MSCs的分離和培養(yǎng)
        1.3.3 hUC-MSCs免疫表型鑒定
    1.4 小結(jié)
二、MCAO模型的制作及評(píng)分
    2.1 對(duì)象和方法
    2.2 結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療MCAO大鼠
    3.1 材料和方法
        3.1.1 試劑及儀器設(shè)備
        3.1.2 hUC-MSCs移植操作步驟
        3.1.3 mNSS評(píng)分測(cè)試行為學(xué)
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌注處死
        3.1.5 腦組織病理學(xué)檢查
        3.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 大鼠大體觀察
        3.2.2 mNSS評(píng)分改變
        3.2.3 病理學(xué)檢查結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 討論
小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述1 人月齊帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展
        參考文獻(xiàn)
    綜述2 間充質(zhì)干細(xì)胞治療缺血性腦卒中的研究進(jìn)展
        參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Influence of acupuncture on neural movement function in rats with middle cerebral artery occlusion-A randomized controlled trial[J]. 常曉波,樊小農(nóng),王舒,楊沙,楊雪,張亞男,石學(xué)敏.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2012(01)
[2]臍血間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠腦缺血性損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 趙迪誠,杜鵑,陳紅,盧連梅,蘇江.  中華全科醫(yī)學(xué). 2012(02)
[3]人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)臍血CD8+T細(xì)胞活化及周期和IL-17分泌的影響[J]. 王國艷,張思英,李廣云,王斐斐,都海波,欒希英.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2012(01)
[4]殼聚糖/亞磷酸化殼聚糖復(fù)合海綿復(fù)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞用于異位成骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 孫國棟,李志忠,焦延鵬,周長忍,焦根龍,林永新.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2011(12)
[5]人臍帶羊膜來源和骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)控特征比較[J]. 徐曼,劉元林,陳晨,廖麗,張毅,陳虎.  中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2011(05)
[6]Treatment of Cerebral Ischemia with Combination of Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells and Chinese Medicine[J]. 關(guān)瑩,趙永華.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2011(09)
[7]不同數(shù)量BMSCs對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)生長影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 許文靜,趙喆,趙斌,王玉,彭江,張莉,陳繼鳳,盧世璧.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2011(10)
[8]血小板裂解液對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外成軟骨分化的影響[J]. 馮學(xué)濤,田少奇,孫康,張積華,張才龍,劉世海,周明,呂江濤.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2011(10)
[9]臍帶源性和臍血源性間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的比較[J]. 管英華,謝揚(yáng)虎,魏曉巍,李玉云.  中華全科醫(yī)學(xué). 2011(09)
[10]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和超微結(jié)構(gòu)[J]. 朱少芳,何援利,付霞霏.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(04)



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