發(fā)布時間：2022-02-20 15:52

　　目的：觀察氯化鋰對缺氧PC12細(xì)胞凋亡的影響,明確氯化鋰的腦保護作用，為氯化鋰用于臨床缺血缺氧性疾病的治療提供理論依據(jù)及研究方向。方法：PC12細(xì)胞株由上海市中科院細(xì)胞庫提供，培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中。當(dāng)細(xì)胞融合度達到70%-80%時傳代，取生長對數(shù)期細(xì)胞用于實驗。將PC12細(xì)胞在缺氧環(huán)境下培養(yǎng)0h，12h，24h，36h后采用Annexin-v FITC/PI雙染流式細(xì)胞分析儀檢測細(xì)胞凋亡率；0h為對照組，12h，24h，36h為實驗組，觀察凋亡高峰時間用于后期實驗。PC12細(xì)胞分為：A正常組，B缺氧組，C缺氧+氯化鋰治療組,D單獨氯化鋰組，四組不同方式培養(yǎng)；采用Annexin-v FITC/PI雙染流式細(xì)胞分析儀檢測細(xì)胞不同處理條件凋亡率的改變；CAM活細(xì)胞染色檢測細(xì)胞存活率；RT-PCR檢測Caspase-3，α5、β1整合素mRNA表達。結(jié)果：1、實驗組（12h，24h和36h）PC12細(xì)胞凋亡率及死亡率明顯高于對照組，[23.12±0.048，34.91±0.104，36.58±0.092與4.11±0.081；P＜0.05]；36h組凋亡率較24h組稍有增加... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗細(xì)胞
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 主要儀器和設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 器材準(zhǔn)備
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 細(xì)胞缺氧培養(yǎng)
        2.2.4 細(xì)胞凍存
        2.2.5 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.6 實驗分組及給藥方式
        2.2.7 流式細(xì)胞儀檢測 PC12 細(xì)胞凋亡率
        2.2.8 CAM 活細(xì)胞染色檢測 PC12 存活率
        2.2.9 RT-PCR 檢測 Caspase-3，α5 和β1 基因表達
        2.2.10 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 缺血缺氧誘導(dǎo) PC12 細(xì)胞凋亡
    3.2 氯化鋰抑制缺血缺氧引起的 PC12 細(xì)胞凋亡
    3.3 氯化鋰促進 PC12 細(xì)胞在缺氧條件下的存活
    3.4 氯化鋰下調(diào)缺氧條件下 PC12 表面 caspase-3mRNA 的表達，上調(diào)α5 和β1mRNA 的表達
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 進一步工作的方向
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3635370