目的:探討GCH1抑制劑DAHP對(duì)LPS誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞自噬表達(dá)水平的影響。方法:本研究選取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的生長(zhǎng)狀態(tài)良好的小鼠BV2小膠質(zhì)細(xì)胞為研究對(duì)象,采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）干預(yù)建立神經(jīng)炎癥性疼痛細(xì)胞模型。按照不同的干預(yù)方法將小膠質(zhì)細(xì)胞分為以下四組:正常對(duì)照組、LPS誘導(dǎo)活化組、LPS誘導(dǎo)+DAHP組、DAHP組。通過(guò)RT-PCR技術(shù)檢測(cè)GCH1、LC3B、Beclin1在mRNA水平上的表達(dá);通過(guò)Western Blot技術(shù)檢測(cè)GCH1、LC3B、Beclin1在蛋白質(zhì)水平上的表達(dá)。結(jié)果:1.未經(jīng)干預(yù)過(guò)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)特征表現(xiàn)為體積較小的圓形或卵圓形,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,生長(zhǎng)狀態(tài)較好,呈貼壁生長(zhǎng),而LPS干預(yù)后的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)特征變化較大,多數(shù)細(xì)胞從較小的圓形、卵圓形趨化成體積較大形態(tài)不規(guī)則的分枝狀。DAHP干預(yù)后的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)較未干預(yù)前其形態(tài)變化不明顯。2.RT-PCR結(jié)果顯示:與正常組相比,LPS誘導(dǎo)活化組GCH1、LC3B、Beclin1的mRNA表達(dá)明顯增加,差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與LPS誘導(dǎo)活化組相比,LPS+DA... 

【文章來(lái)源】：濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BV2小膠質(zhì)細(xì)胞不同倍鏡下的形態(tài)觀察2RT-PCR檢測(cè)各組內(nèi)GCH1、LC3B、Beclin1基因mRNA的表達(dá)與正常組相比，LPS誘導(dǎo)活化組GCH1、LC3B、Beclin1的

濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院碩士專業(yè)學(xué)位論文達(dá)明顯增加，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與 LPS LPS+DAHP 組可以明顯降低 GCH1、LC3B、Becli達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與正常組相比，DAHP 1 的 mRNA 的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而 Bec mRNA 表達(dá)變化無(wú)明顯差異。（詳見(jiàn)圖 2、3、4）

圖 3：RT-PCR 檢測(cè)各組 Beclin1 基因的相對(duì)表達(dá)量相比，LPS 組 Beclin1 mRNA 表達(dá)**P＜0.01，有顯著的統(tǒng)計(jì)，LPS+DAHP 組 Beclin1 mRNA 表達(dá)#P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]Neuroprotective effects of rapamycin on spinal cord injury in rats by increasing autophagy and Akt signaling[J]. Xi-Gong Li,Jun-Hua Du,Yang Lu,Xiang-Jin Lin.  Neural Regeneration Research. 2019(04)
[3]Caspase-1 inhibition attenuates activation of BV2 microglia induced by LPS-treated RAW264.7 macrophages[J]. Yang Pan,Bo Shen,Qin Gao,Jun Zhu,Jingde Dong,Li Zhang,Yingdong Zhang.  The Journal of Biomedical Research. 2016(03)



本文編號(hào)：3600141