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基于細胞凋亡調(diào)節(jié)因子Bax、bcl-2的a-細辛醚對癲癇神經(jīng)元保護機制的研究

發(fā)布時間:2022-01-17 06:07
  目的:α-細辛醚是中藥石菖蒲(Rhizoma Acori Tatarinowii)的主要活性成分之一,祖國醫(yī)學(xué)認為石菖蒲能化痰開竅益智,鎮(zhèn)靜止痙,是歷代醫(yī)家治療癲癇的首選中藥,但是作用機制不詳。本研究應(yīng)用KA癲癇大鼠為模型,觀察癲癇大鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能和腦電圖的變化情況,檢測癲癇大鼠海馬組織中Bax、bcl-2基因的表達情況,探討α-細辛醚在抗癲癇方面的作用機制。方法:50只雄性SD大鼠隨機分為兩組,分別為正常對照組(n=10)和癲癇模型組(n=40)。模型組再隨機分為4組,每組10只,分別為KA組、α-細辛醚低濃度組(6mg/kg)、中濃度組(12mg/kg)和高濃度組(24mg/kg)。α-細辛醚組連續(xù)給藥10d,每天經(jīng)腹腔注射給藥一次,第10d取材。癲癇模型組以紅藻氨酸(Kainic acid, KA)側(cè)腦室注入誘發(fā)大鼠癲癇發(fā)作。1.腦電圖(electroencephalogram, EEG)觀察:各組大鼠在造模后應(yīng)用數(shù)字化腦電圖儀連續(xù)進行30min EEG描記。觀察各組大鼠EEG癇性叢狀放電波發(fā)生頻率,振幅變化和每一叢狀放電波中峰電位數(shù)目(number of spikes in... 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
目錄
中英文縮寫對照表
摘要
ABSTRACT
前言
技術(shù)路線
第一部分:α-細辛醚對KA癲癇大鼠腦電圖的影響
    1. 實驗材料
        1.1. 主要的實驗儀器與設(shè)備
        1.2. 主要實驗藥品與試劑
        1.3. 實驗動物
    2. 方法
        2.1. 模型建立與給藥
        2.2. EEG描記
        2.3. 統(tǒng)計學(xué)處理
    3. 結(jié)果
        3.1. 模型建立
        3.2. EEG觀察
    4. 討論
第二部分:α-細辛醚對KA致癲癇大鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的影響
    1. 實驗材料
        1.1. 主要的實驗儀器與設(shè)備
        1.2. 主要實驗藥品與試劑
        1.3. 實驗動物與分組
    2. 方法
        2.1. 模型建立與給藥
        2.2. 斜板試驗
        2.3. 懸吊試驗
        2.4. Morris水迷宮試驗
        2.5. 統(tǒng)計學(xué)處理
    3. 結(jié)果
        3.1 模型建立
        3.2. 斜板試驗
        3.3. 懸吊試驗
        3.4. Morris水迷宮試驗
    4. 討論
第三部分:基于細胞凋亡調(diào)節(jié)因子Bax、bcl-2的α-細辛醚對癲癇神經(jīng)元保護機制的研究
    1. 實驗材料
        1.1. 主要的實驗儀器與設(shè)備
        1.2. 主要實驗藥品與試劑
        1.3. 實驗動物與分組
    2. 方法
        2.1. 模型建立與給藥
        2.2. 免疫熒光化學(xué)法檢測Bax、bcl-2蛋白的表達
            2.2.1. 組織石蠟包埋
            2.2.2. 免疫熒光實驗步驟
            2.2.3. 熒光數(shù)據(jù)分析
        2.3. 熒光定量PCR法檢測Bax、bcl-2基因的表達
            2.3.1. mRNA的提取和cDNA的合成
                2.3.1.1. 提取RNA
                2.3.1.2 樣品RNA純度檢測
                2.3.1.3. 樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(cDNA合成)
            2.3.2. 引物的設(shè)計與合成與反應(yīng)體系的優(yōu)化
                2.3.2.1. 引物的設(shè)計與合成
                2.3.2.2. 反應(yīng)體系優(yōu)化
            2.3.3 RT-PCR反應(yīng)
        2.4. 統(tǒng)計學(xué)處理
    3. 結(jié)果
        3.1. 模型建立與EEG監(jiān)測
        3.2. Bax、bcl-2蛋白的表達
        3.3. Bax、bcl-2mRNA的表達
    4. 討論
綜述:中藥石菖蒲及其主要成分α-細辛醚的研究進展
    第一節(jié):石菖蒲
        1. 中藥屬性
        2. 藥理
            2.1. 中藥論證
            2.2. 近代藥理
        3. 毒理
        4. 化學(xué)
    第二節(jié):α-細辛醚
        1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)式
        2. 藥物代謝動力學(xué)
        3. 藥理
    小結(jié)
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]石菖蒲α-細辛醚對Lithium-Pilocarpine癲癇模型GABA系統(tǒng)的調(diào)控作用[J]. 苗靜琨,陳啟雄,吳小玫,張曉萍.  中國藥理學(xué)通報. 2011(08)
[2]細辛腦注射液對槐定堿致癇大鼠Caspase3及熱休克蛋白-70表達的影響[J]. 甄軍麗,王維平.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2010(03)
[3]α-細辛腦的抗驚厥、抗癲癇作用及其機制研究[J]. 韓琳,湯道權(quán),印曉星,高媛媛,魏雅芹.  中國藥理學(xué)通報. 2009(07)
[4]α-細辛腦防治青霉素誘導(dǎo)大鼠癲癇發(fā)作實驗研究[J]. 任亮,常陸林,馬菲,杜鋼軍.  中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志. 2009(01)
[5]石菖蒲α-細辛醚抗癲癇作用的實驗研究[J]. 苗靜琨,吳小玫,陳啟雄,張曉萍.  中國藥理學(xué)通報. 2008(12)
[6]石菖蒲的化學(xué)成分與藥理研究進展[J]. 陳樂真,屠凌嵐.  浙江實用醫(yī)學(xué). 2008(03)
[7]Effects of acrous gramineus and its component, alpha-asarone, on apoptosis of hippocampal neurons after seizure in immature rats[J]. Libin Yang1, Shulei Li2, Yanzhi Huang3, Jianmin Liang1, Yuhong Wang4 1Department of Pediatrics, the First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, Jilin Province, China 2Department of Histology and Embryology, Norman Bethune Medical School, Jilin University, Changchun 130021, Jilin Province, China 3Department of Internal Medicine, Children Hospital of Changchun City, Changchun 130061, Jilin Province, China 4Department of Neurology, the First Clinical Hospital affiliated to Harbin Medicine University, Harbin 150001, Heilongjiang Province, China.  Neural Regeneration Research. 2008(01)
[8]紅藻氨酸致癎大鼠神經(jīng)元凋亡的動態(tài)研究[J]. 吳原,龐家容,鄭金甌,鄧曉清,梁秀琳,李佳荃,陳志穎.  臨床神經(jīng)電生理學(xué)雜志. 2007(03)
[9]氨己烯酸對自發(fā)性癲癇大鼠小發(fā)作和大發(fā)作的作用[J]. 聶宏光,蔡際群,姚維范.  中國藥理學(xué)通報. 2007(05)
[10]石菖蒲的研究進展[J]. 呂剛,李婷婷.  時珍國醫(yī)國藥. 2006(07)



本文編號:3594189

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