目的：探討線粒體分裂抑制齊（mitochondrial division inhibitor,mdivi一1）在腦缺血再灌注損傷（ischemia/reperfusion injury,IRI）中對能量代謝的影響。方法：將體外培養(yǎng)8d的Wistar大鼠海馬神經(jīng)元隨機(jī)地分為4組：正常對照組（C組）、賦形劑組（V組）、mdivi-1+缺血再灌注組（M組）、缺血再灌注組（Ⅰ組）。利用海馬神經(jīng)元氧糖剝奪法建立缺血再灌注模型,M組建立缺血再灌注模型之前給予mdivi-1預(yù)處理40min。缺血6h,再灌注20h后應(yīng)用Western blot法檢測各組線粒體分裂蛋白1（dynamin-related protein1,Drp1）.B細(xì)胞淋巴癌/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相關(guān)X蛋白（Bcl-2Associated X Protein,Bax）的表達(dá)水平,酶標(biāo)儀法測三磷酸腺苷（ATP）含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、線粒體呼吸鏈酶復(fù)合體ⅠⅡ、Ⅲ和Ⅳ的活性。結(jié)果：與C組比較,M組和Ⅰ組ATP含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、線粒體呼吸鏈酶復(fù)合... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物
    1.2 材料與試劑
    1.3 主要儀器與設(shè)備
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 海馬神經(jīng)元氧糖剝奪/復(fù)氧模型的建立
    2.3 實(shí)驗(yàn)分組
    2.4 蛋白質(zhì)提取
    2.5 WESTERN BLOT法檢測DRP1、BCL-2/BAX蛋白表達(dá)水平
    2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞膜電位(△ψM)
    2.7 線粒體分離和線粒體呼吸鏈酶復(fù)合體Ⅰ Ⅱ Ⅲ和Ⅳ的活性檢測
    2.8 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性測定
    統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)觀察
    3.2 WESTERN BLOT檢測DRP1和BCL-2/BAX蛋白表達(dá)
    3.3 流式細(xì)胞術(shù)及熒光顯微鏡檢測線粒體膜電位
    3.4 線粒體呼吸鏈酶復(fù)合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的活性
    3.5 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]線粒體動力學(xué)改變在神經(jīng)變性疾病中的地位[J]. 李文偉,朱敏,呂傳真.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2011(05)
[2]腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制及藥物保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 汪瑩,許棟明,王文,高東明,張麗,艾厚喜,李林.  中國康復(fù)理論與實(shí)踐. 2010(12)
[3]細(xì)胞凋亡的線粒體通路[J]. 方敏,王曉東.  北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2002(01)



本文編號：3591450