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DRP1調(diào)控ENT1參與大鼠癲癇發(fā)作的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-13 23:22
  目的:探討抑制線粒體分裂蛋白信號(hào)通路后,觀察氯化鋰-匹魯卡品癲癇大鼠模型行為學(xué)改變及DRP1和ENT1表達(dá)變化。方法:,選取健康成年雄性SD大鼠,腹腔注射氯化鋰-匹魯卡品建立癲癇動(dòng)物模型,將大鼠隨機(jī)分為四個(gè)實(shí)驗(yàn)組:癲癇組(6h、24h、72h、1W四個(gè)時(shí)間點(diǎn),n=5×4)、mdivi-1組(DRP1抑制劑)(n=5)、DMSO溶劑對(duì)照組(n=5)與正常對(duì)照組(n=5)。造模成功后,選首次發(fā)作潛伏期,首次癲癇發(fā)作后1小時(shí)內(nèi)癲癇大發(fā)作(Racine評(píng)分4級(jí)及以上視為大發(fā)作,即造模成功)次數(shù),兩方面的行為學(xué)來(lái)評(píng)估各組大鼠癲癇發(fā)作程度;透射電鏡觀察大鼠海馬線粒體改變;應(yīng)用Western Blot、免疫組織化學(xué)、免疫熒光標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)DRP1在各實(shí)驗(yàn)組大鼠顳葉皮質(zhì)與海馬區(qū)的表達(dá)情況;應(yīng)用Western Blot檢測(cè)ENT1在各實(shí)驗(yàn)組大鼠顳葉皮質(zhì)與海馬區(qū)的表達(dá)情況。結(jié)果:1.行為學(xué)結(jié)果:正常組大鼠無(wú)癲癇發(fā)作,癲癇組與溶劑對(duì)照組的潛伏期分別為24.4±5.12min、23.6±4.67 min,mdivi-1抑制劑組為38.8±1.30 min;首次癲癇大鼠大發(fā)作次數(shù)為9.0±0.52、溶劑對(duì)照組為9... 

【文章來(lái)源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

DRP1調(diào)控ENT1參與大鼠癲癇發(fā)作的作用及機(jī)制研究


mdivi-1可使匹羅卡品誘發(fā)的首次癲癇發(fā)作潛伏期明顯延長(zhǎng),降低癲癇發(fā)作次數(shù)

CA1區(qū),線粒體,癲癇,神經(jīng)元


遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文 羅 忠2.2 各組大鼠海馬 CA1 區(qū)線粒體超微結(jié)構(gòu)改變選正常組、24h 癲癇組與 mdivi-1 組大鼠海馬 CA1 區(qū)腦組織,透射電鏡觀察各組大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元線粒體超微結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):正常組大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元線粒體結(jié)構(gòu)完好無(wú)損,未見(jiàn)線粒體腫脹及線粒體嵴的破壞;癲癇組與 mdivi-1 組大鼠神經(jīng)元線粒體存在不同程度的損傷,癲癇組大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元線粒體明顯腫脹,線粒體結(jié)構(gòu)明顯破壞,部分內(nèi)外膜崩解;mdivi-1 組大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元線粒體稍腫脹,可見(jiàn)部分嵴的分裂,基質(zhì)密度降低,未見(jiàn)膜的崩解(圖 2)

柱狀圖,免疫印跡,海馬,柱狀圖


圖 3 正常和不同時(shí)間點(diǎn)癲癇大鼠海馬中 DRP1 的免疫印跡與 DRP1/β-actin 統(tǒng)計(jì)柱狀圖。Fig3 Normal and epilepsy rats hippocampus the DRP1 receptors of western blot and the ratio ofDRP1 receptor/β-Tubulin statistical results.Note:*P<0.05 vs Con group,##P<0.05 vs EP(24h)group,#P>0.05 vs EP(24h) group各組大鼠顳葉新皮質(zhì)中 DRP1 表達(dá)結(jié)果:DRP1 在正常大鼠顳葉新皮質(zhì)中有基礎(chǔ)表達(dá),DRP1 蛋白與β-actin 內(nèi)參蛋白的免疫印跡強(qiáng)度比值為 0.43±0.04;DRP1 蛋白與正常對(duì)照組及不同時(shí)間點(diǎn)癲癇組免疫印跡強(qiáng)度比值分別為:0.50±0.02、0.81±0.01、1.18±0.02、0.60±0.02、0.45±0.02,癲癇發(fā)作 6h 開(kāi)始直到發(fā)作后 1W 的 4 個(gè)時(shí)間點(diǎn)Drp1 蛋白的表達(dá)水平上升,24h 時(shí)間點(diǎn) DRP1 蛋白表達(dá)最高,與正常對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),6h、1W 這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),DRP1 的表達(dá)量與正常對(duì)照組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在 mdivi-1 組、DMSO 溶劑對(duì)照組大鼠顳葉新皮質(zhì)中免疫印跡強(qiáng)度比值分別為:0.66±0.01、1.17±0.04,mdivi-1 組 DRP1 蛋白的表達(dá)較24h癲癇組顯著下調(diào),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);溶劑對(duì)照組與癲癇組(24h)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Multimodal brain monitoring in fulminant hepatic failure[J]. Fernando Mendes Paschoal Jr,Ricardo Carvalho Nogueira,Karla De Almeida Lins Ronconi,Marcelo de Lima Oliveira,Manoel Jacobsen Teixeira,Edson Bor-Seng-Shu.  World Journal of Hepatology. 2016(22)
[2]醒腦開(kāi)竅針刺法結(jié)合高壓氧治療一氧化碳中毒遲發(fā)性腦病的臨床觀察[J]. 茅敏,饒萍,牟欣,郭蘭,張靈.  中國(guó)針灸. 2015(03)



本文編號(hào):3587333

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