發(fā)布時(shí)間：2022-01-09 19:08

　　目的:動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是缺血性卒中的重要病因。炎癥,尤其是NLRP3炎性小體參與了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的核心過(guò)程,增強(qiáng)自噬可以抑制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展,二者之間的相互作用近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。近期有研究顯示NLRP3炎性小體可以被自噬降解,這一過(guò)程伴有炎性小體組成蛋白的泛素化修飾。但是動(dòng)脈粥樣硬化中兩者的關(guān)系及泛素化在兩者銜接中的作用及相關(guān)機(jī)制尚不明確。本研究主要有以下目標(biāo):1、驗(yàn)證ox-LDLs對(duì)泡沫細(xì)胞中炎癥和自噬的影響;2、驗(yàn)證泡沫細(xì)胞中自噬和炎癥的關(guān)系;3、探索自噬是通過(guò)影響哪些炎癥相關(guān)蛋白調(diào)節(jié)NLRP3炎性小體功能;4、確定在自噬精確識(shí)這些炎癥相關(guān)蛋白過(guò)程中起作用的泛素鏈。方法:1、用ox-LDLs干預(yù)THP-1來(lái)源的巨噬細(xì)胞建立泡沫細(xì)胞模型。在泡沫細(xì)胞模型中,給與時(shí)間梯度和濃度梯度的ox-LDLs刺激,應(yīng)用Western blot和ELISA方法,檢測(cè)NLRP3炎性小體及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)水平,觀察ox-LDLs對(duì)NLRP3炎癥和自噬的影響;2、應(yīng)用雷帕霉素和3-MA上調(diào)或下調(diào)泡沫細(xì)胞中自噬水平,觀察炎癥水平及NLRP3炎性小體相關(guān)蛋白表達(dá)變化;3、對(duì)泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)染p62-... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ox-LDLs和炎癥的關(guān)系

ox-LDLs和自噬的關(guān)系

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文16比，p62-siRNA組細(xì)胞裂解液中NLRP3、ASC（圖4b）和p20（圖4b，4c）及上清中的IL-1β（圖4d）的表達(dá)水平升高。這提示，抑制p62的表達(dá)起到了和3-MA、巴弗洛霉素相似的效果，增強(qiáng)了炎癥。圖3自噬對(duì)炎癥的影響。（a，b，c）抑制或增強(qiáng)自噬后，p62、LC3及NLRP3炎性小體相關(guān)蛋白表達(dá)變化；（d）抑制或增強(qiáng)自噬后，細(xì)胞培養(yǎng)液上清中IL-1β濃度變化；（e）巴弗洛霉素干預(yù)下，NLRP3和ASC表達(dá)變化；*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]炎癥小體在血栓性疾病發(fā)病中的作用研究進(jìn)展[J]. 王金霞,劉愛(ài)飛,李方林,陳懿建.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2017(04)
[2]動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病的炎癥機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉俊田.  西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[3]缺血缺氧狀態(tài)下細(xì)胞自噬的研究進(jìn)展[J]. 張丹,王海杰.  國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志. 2009(04)
[4]缺血/再灌注過(guò)程中心肌細(xì)胞自噬研究進(jìn)展[J]. 李欣志,劉建勛.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2008(06)



本文編號(hào)：3579279