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膠質(zhì)瘤細胞及其干細胞的放射敏感性差異

發(fā)布時間:2022-01-06 06:55
  目的:1、從人腦膠質(zhì)瘤中分離培養(yǎng)腦膠質(zhì)瘤干細胞,觀察并檢測其在體外的增殖分化情況,用干細胞標志物CD133初步鑒定,建立人腦腫瘤干細系。2、研究普通腦膠質(zhì)瘤細胞及其干細胞的放射敏感性差異方法:1、取患者膠質(zhì)瘤組織,分離成單細胞懸液,接種于含血清的DMEM/F12培養(yǎng)液中首先培育出普通膠質(zhì)瘤細胞,再將部分膠質(zhì)瘤細胞置于添加表皮生長因子、堿性成纖維生長因子及B27的無血清培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),使其中的膠質(zhì)瘤干細胞(BTSCs)克隆增殖;對增殖形成的腫瘤干細胞球進行傳代培養(yǎng),部分克隆球細胞做單克隆培養(yǎng);另一部分干細胞球接種于含血清培養(yǎng)基,觀察其分化現(xiàn)象;利用免疫細胞化學檢測腦腫瘤干細胞球特異性標志物CD133的表達。2、直線加速器分別以0、2、6、8、10Gy X線照射膠瘤細胞及BTSCs,然后繼續(xù)培養(yǎng)36H。流式細胞儀檢測上述細胞中CD133+細胞比率;采用MTT法檢測細胞的存活情況;平板克隆形成實驗檢測兩種細胞的克隆形成能力。結(jié)果:1.細胞體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn):少數(shù)腫瘤細胞能夠在無血清培養(yǎng)基中存活并懸浮增殖,形成克隆性腦腫瘤干細胞球,傳代后腦腫瘤干細胞仍保持很強自我更新和增殖能力,表達特異性標志物C... 

【文章來源】:昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
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中文摘要
Abstract
引言
材料方法
    材料
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結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
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致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Abrogation of Chk1-mediated S/G2 checkpoint by UCN-01 enhances ara-C-induced cytotoxicity in human colon cancer cells[J]. Yves POMMIER.  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(06)



本文編號:3571970

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