發(fā)布時(shí)間：2021-12-29 03:57

　　目的:1.研究人臍血單個(gè)核細(xì)胞（CB-MNCs）及臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs）對(duì)大鼠腓腸肌失神經(jīng)損傷的治療作用。2.比較CB-MNCs及UUC-MSCs對(duì)大鼠腓腸肌失神經(jīng)損傷治療效果的差異,為尋找最佳治療手段提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.人臍血單個(gè)核細(xì)胞（CB-MNCs）及臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs）的制備1.1 CB-MNCs的分離及鑒定:新鮮臍帶血用淋巴細(xì)胞分離液1:1 1比例經(jīng)密度梯度離心后獲得單個(gè)核細(xì)胞,生理鹽水離心清洗三遍,臺(tái)盼藍(lán)拒染試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表型;注射用生理鹽水調(diào)整密度為1X 106個(gè)/mL并在1小時(shí)內(nèi)應(yīng)用,剩余細(xì)胞液氮凍存?zhèn)溆谩?.2 UC-MSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定:新鮮臍帶剪碎,組織塊貼壁培養(yǎng),直到可見細(xì)胞自組織塊周圍爬出。初代細(xì)胞傳代培養(yǎng)3次后,于顯微鏡下觀察記錄細(xì)胞形態(tài);流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表型;經(jīng)成骨、成脂及成軟骨誘導(dǎo)分化后,分別進(jìn)行茜素紅、油紅0和阿利辛藍(lán)染色鑒定其分化能力。細(xì)胞培養(yǎng)至第5代時(shí)凍存?zhèn)溆谩?.大鼠腓腸肌失神經(jīng)損傷模型的建立:40只4～6周齡Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（Normal組）10只和大鼠坐骨神經(jīng)離斷... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＣＢ－ＭＮＣｓ鑒定示意圖??

Ｙｅｌｌｏｗ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｏａｅ?ｆＹＥＬ－ＨＬｏａ＇ｉ?ＶｅＭｃｎｒｔ?Ｒｕｏｎｅｓｃｅｎｏｅ?ｆＹＥＬ－ＨＬｏａ）??ＣＤ３４?Ｗｏｔ?Ｐ０２，?Ｑ８ｔｅ＜３?ｏｎ?ＰＱｌ．Ｒｉ?ＣＤ４４?Ｐｉｇ？?ＰＱＳ．?ａｃｔｅｄ?ｏｎＰＱｉ．Ｒｉ?ＣＤ４５?＾ｌ〇ｔ?＾２－?ｇａｔｇｄ?＾?＾０１＾１??Ｓｉ＾３?ＪｉＥ??ｔｏ？?ｔｏ１?１０】?ｉｑ３?ｉ〇＊?ｉｏ￡?ｉｏ１?ｉｏ＊?ｉ〇Ｊ?ｉｏ＊?ｉ〇?ｉｔｒ?ｉｃ２?ｉｃｒ?ｉｏ４??ＹｅＨｏｗ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?（ＹＥｔ－ＨＬｏｏ）?Ｇｒｅｅｎ?Ｆ１ｕ〇ｒｅ？ｃｅｎ？?（ＧＲＮ－ＨＬｏｏ）?Ｙｅｌｌｏｗ?Ｈｕｏｒｅｓｃｅｎｏｅ?ｒＹｆｌ－ＭＬｏ〇）??ＣＤ?７?３?的?２，?ｇａｔｅｄ?ｏｎ?ｐｍ?．Ｒ１?ＣＤ?９０?＾°＊?〇〇?Ｐ〇２ｔ?ｇａｔｅｄ?ＰＯｌ．ｄｌ??ｓ｜＾Ｈ?ｉｌｒｘｉ?ｗｃ＾??Ｖ?ｖ?：１，?，?｜）Ｗ｜｜?，?：ｌＪｃ，Ｔ－，Ｖ?，ｊ??Ｅ?ｉ〇ｃ?ｉｏ１?ｉ〇２?ｉ〇３?ｉｏ?‘?ｉ〇－?ｉｏ１?ｉ〇２?ｉｏ３?ｉｏ４?ｊ〇：?ｉｏ：?ｉｏ２?ｉｏ２?ｉ〇－＇??Ｙｅｌｌｏｗ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?（Ｙ￡Ｌ－ＨＬ〇ｑ）?ＲｅｓＪ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｒｖｃｅ?ｆＲＥＯ－Ｍｔｏｏ）?Ｙｅｌｌｏｗ?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ＣＹＥｌ－Ｈｌｏｑ）??圖２?ＵＣ－ＭＳＣｓ鑒定示意圖??Ａ：?ＵＣ－ＭＳＣｓ形態(tài)學(xué)表現(xiàn)；Ｂ：茜素紅染色；Ｃ：油紅Ｏ染色；Ｄ：阿利辛藍(lán)染色；Ｅ：流??式細(xì)胞術(shù)鑒定ＵＣ－ＭＳＣｓ細(xì)胞表型。??

圖２?ＵＣ－ＭＳＣｓ鑒定示意圖??Ａ：?ＵＣ－ＭＳＣｓ形態(tài)學(xué)表現(xiàn)；Ｂ：茜素紅?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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