目的:檢測動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血（aSAH）患者血漿外泌體miR-202-5p的表達(dá)水平,探討其與aSAH患者病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的關(guān)系。方法:1.選擇2017年6月至2018年6月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科、神經(jīng)外科住院的39例aSAH患者作為研究對象,性別、年齡相匹配的20名健康人作正常對照組。研究對象據(jù)Hunt-Hess分級法分為輕癥組和重癥組,出院后3個(gè)月mRS評分分為預(yù)后良好組和預(yù)后不良組。2.采集實(shí)驗(yàn)對象外周靜脈血樣,離心并提取血漿,分離血漿外泌體,用透射電鏡鑒定外泌體并提取血漿外泌體RNA,交由深圳承啟生物科技有限公司進(jìn)行測序分析。在本課題組的另一項(xiàng)研究基礎(chǔ)上,通過對12例顱內(nèi)動(dòng)脈瘤患者（未破裂、輕癥、重癥各4例）和4例健康者進(jìn)行高通量測序分析,得到血漿外泌體miRNA表達(dá)譜,篩選出表達(dá)差異顯著的miR-202-5p進(jìn)行PCR驗(yàn)證。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR測定正常組和病例組血漿標(biāo)本miR-202-5p的相對表達(dá)水平。3.使用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。兩組間符合正態(tài)分布的計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn),非正態(tài)分布計(jì)量資料采用秩和檢驗(yàn),分類變量資料采用χ^2<... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

透射電鏡下所見的外泌體（黑色箭頭所指為外泌體）

圖 5-1 透射電鏡下所見的外泌體（黑色箭頭所指為外泌體）xosomes seen under transmission electron microscope (the black arrow indicates exoiR-202-5p 的 RT－qPCR 的擴(kuò)增曲線與溶解曲線圖 5-2 所示，在相同條件下 miR-202-5p、外參基因分別進(jìn)行 PCR 定量檢測系統(tǒng)上實(shí)時(shí)收集熒光信號得出擴(kuò)增曲線。圖熒光閾值直線相交點(diǎn)的橫坐標(biāo)即為各樣本 miR-202-5p 的 C曲線表明 miR-202-5p 及外參基因得到有效擴(kuò)增。

血漿外泌體miR-202-5p表達(dá)與動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者病情和預(yù)后的關(guān)系 2019屆碩士學(xué)位論文同時(shí) PCR 儀在擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后還制作了 2 個(gè)基因的熔解曲線，如圖 5-所示，熔解曲線可見銳利單峰，說明基因擴(kuò)增產(chǎn)物較單一。且波峰所對應(yīng)的解鏈溫度（Tm 值）都高于 75℃，所得結(jié)果可信度高。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3542171