第一部分賴氨酸致原代大鼠紋狀體神經(jīng)元神經(jīng)毒性的體外研究目的分離培養(yǎng)高純度的原代大鼠紋狀體神經(jīng)元,探討賴氨酸對體外培養(yǎng)紋狀體神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用。方法分離出生24h內(nèi)SD乳鼠的紋狀體,應(yīng)用胰酶消化、無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)法培養(yǎng)紋狀體神經(jīng)元。利用微管相關(guān)蛋白（microtubule-associated protein MAP2）染色免疫熒光及流式細(xì)胞方法鑒定神經(jīng)元純度。不同濃度的賴氨酸（0、5、10、15、20mmol/L）干預(yù)神經(jīng)元24h后,MTT法測定細(xì)胞活性,探討不同濃度賴氨酸對原代紋狀體神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用。結(jié)果MAP2免疫熒光法顯示培養(yǎng)細(xì)胞神經(jīng)元純度為92.4±1.6%,MAP2染色流式細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示神經(jīng)元純度為94.3±2.5%。MTT結(jié)果顯示小于10mmol/L賴氨酸干預(yù)24h對神經(jīng)元存活無影響。15mmol/L賴氨酸干預(yù)24h神經(jīng)元存活率為84.63%,20mmol/L賴氨酸干預(yù)24h神經(jīng)元存活率降為45.60%。結(jié)論胰酶消化無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)法可成功培養(yǎng)高純度的大鼠紋狀體神經(jīng)元。賴氨酸干預(yù)24h,濃度不超過10mmol/L時(shí)對神經(jīng)元無毒性,濃度達(dá)到15mmol/L以上時(shí),賴氨酸神... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略表
前言
    參考文獻(xiàn)
中文摘要
Abstract
第一部分 賴氨酸致原代大鼠紋狀體神經(jīng)元神經(jīng)毒性的體外研究
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 慢病毒介導(dǎo)的GCDH基因沉默和賴氨酸過量攝取對紋狀體神經(jīng)元的神經(jīng)毒性作用
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 賴氨酸對GCDH基因沉默紋狀體神經(jīng)元神經(jīng)毒性作用的可能機(jī)制探討
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄 博士期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)選擇性篩查遺傳代謝病高危患兒552例初步分析[J]. 婁燕,尹娜,陳鳳琴,程亞穎,徐麗瑾,戴方,宋曉濤.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2011(04)
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本文編號：3541250