周?chē)窠?jīng)損傷是臨床外科常見(jiàn)的疾病之一,其治療及功能恢復(fù)長(zhǎng)期以來(lái)都是臨床醫(yī)生面臨的一項(xiàng)重要挑戰(zhàn)。目前臨床上自體神經(jīng)移植是周?chē)窠?jīng)缺損修復(fù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但由于其存在來(lái)源受限、犧牲供區(qū)次要神經(jīng)功能等因素其臨床應(yīng)用受到限制,因此人工神經(jīng)為臨床修復(fù)提供了一個(gè)新思路,成為目前周?chē)窠?jīng)損傷修復(fù)的研究熱點(diǎn)。近年來(lái)隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,眾多的材料被應(yīng)用于人工神經(jīng)的制備。蠶絲具有高韌性以及良好的生物相容性,是一種常見(jiàn)的組織工程材料。本課題組前期研究表明利用蠶絲纖維構(gòu)建的微通道人工神經(jīng)導(dǎo)管在引導(dǎo)和促進(jìn)再生神經(jīng)纖維的生長(zhǎng)方面有顯著的效果,但是其在體內(nèi)卻難以降解;在隨后的研究中發(fā)現(xiàn),在炎癥反應(yīng)中的細(xì)胞吞噬作用是其在體內(nèi)降解的主要因素之一,同時(shí)在神經(jīng)損傷修復(fù)早期,適度的炎癥反應(yīng)也有助于促進(jìn)損傷神經(jīng)的修復(fù)。研究表明,當(dāng)周?chē)窠?jīng)組織損傷后,炎癥反應(yīng)隨即被觸發(fā),損傷處以及遠(yuǎn)端全長(zhǎng)神經(jīng)纖維發(fā)生瓦勒氏變性（Wallerian degeneration,WD）,在此過(guò)程中,巨噬細(xì)胞吞噬變性的組織碎片,為神經(jīng)再生掃除障礙,雪旺氏細(xì)胞增殖活化形成Büngner帶,并且分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,促進(jìn)軸突的再生。脂多糖（lipopolys... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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LPS對(duì)各組大鼠血細(xì)胞的影響

第3章脂多糖/蠶絲纖維/PLA復(fù)合人工神經(jīng)的制備與手術(shù)移植23其自然回縮后切除神經(jīng)形成10mm缺損。取各組人工神經(jīng)導(dǎo)管，以LPS組人工神經(jīng)為例（圖3.1），套接于神經(jīng)的斷端，8/0無(wú)創(chuàng)縫合線于神經(jīng)外膜與人工神經(jīng)管壁縫合。最后用2/0縫合線依次將肌肉、皮膚縫合，傷口處注射1mL雙抗以防感染。假手術(shù)組則只切開(kāi)皮膚、鈍性分離肌肉組織暴露出坐骨神經(jīng)后不做任何處理，然后依次將肌肉、皮膚縫合。自體移植組則將切除的10mm坐骨神經(jīng)重新縫合。術(shù)后每組動(dòng)物做好標(biāo)記，分籠喂養(yǎng)。圖3.1人工神經(jīng)導(dǎo)管移植示意圖Figure3.1Schematicdiagramofartificialnerveconduitgraft3.2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間結(jié)果比較采用單因素方差分析，利用Duncan法進(jìn)行多重比較，同一時(shí)間點(diǎn)上標(biāo)不同字母表示差異顯著（P<0.05），同一時(shí)間點(diǎn)上標(biāo)相同字母表示差異不顯著（P>0.05），用Origin9.0進(jìn)行作圖。3.3結(jié)果與討論3.3.1脂多糖/蠶絲纖維/PLA復(fù)合人工神經(jīng)的形態(tài)如圖3.2所示，為了構(gòu)建人工神經(jīng)內(nèi)芯層，對(duì)蠶絲纖維進(jìn)行一系列的處理。將生絲進(jìn)行橫向冰凍切片，結(jié)果顯示，本研究所用生絲由絲膠（SE）和其包裹的單絲（SF）組成，平均每根生絲含18根單絲，單絲橫截面多呈三角形（圖3.2A），平均寬度為13μm。掃描電鏡下觀察生絲的結(jié)構(gòu)，清晰可見(jiàn)每根單絲表面均附著大量絲膠蛋白（圖3.2B）；利用碳酸氫鈉溶液脫絲膠后，單絲表面的絲膠蛋白全部被去除，即得不含絲膠蛋白的熟絲絲束（圖3.2C）；圖3.1D顯示，載LPS的海藻酸鈣凝膠均勻附著于每根單絲表面；圖3.2E顯示，PLA膜具有多孔結(jié)構(gòu)，其覆蓋在載LPS的海藻酸鈣凝膠熟絲絲束表面，一定程度上減緩了LPS的釋放速率。圖3.3顯示，人工神經(jīng)導(dǎo)管長(zhǎng)12mm，內(nèi)徑約1.8mm，管壁厚?

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文24圖3.2蠶絲纖維的處理A.生絲橫截面冰凍切片；B.生絲表面結(jié)構(gòu)（SEM）；C.熟絲表面結(jié)構(gòu)（SEM）D.載LPS海藻酸鈣熟絲表面結(jié)構(gòu)；E.PLA膜覆蓋載LPS海藻酸鈣熟絲表面結(jié)構(gòu)；SF，單絲；SE，絲膠；CA，海藻酸鈣Figure3.2TreatmentofsilkfibersA.Frozensectionofrawsilkcrosssection;B.Rawsilksurfacestructure(SEM);C.Thesurfacestructureofsilkfibers(SEM)D.SurfacestructureofLPS-loadedcalciumalginatesilkfibers;Surfacestructure;SF,monofilament;SE,sericin;CA,calciumalginate圖3.3LPS/蠶絲纖維/PLA復(fù)合人工神經(jīng)形態(tài)A.外部形態(tài)；B.橫截面；C.外表面（SEM）；D.內(nèi)部微通道橫截面（SEM）Figure3.3LPS/silkfiber/PLAcompositeartificialnervemorphologyA.Externalmorphology;B.Crosssection;C.Externalsurface(SEM);D.Internalmicrochannelcrosssection(SEM)3.3.2雪旺氏細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定細(xì)胞在原代培養(yǎng)的第3天，逐漸地從組織塊中脫離出來(lái)，開(kāi)始貼壁增殖，并向周?chē)w移生長(zhǎng)。到第8天時(shí)，已有大量增殖、貼壁的細(xì)胞，細(xì)胞形狀大多呈長(zhǎng)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TNF-α及其受體與乳腺癌的研究進(jìn)展[J]. 張華,許鳳燕.  現(xiàn)代免疫學(xué). 2019(03)
[2]Comparison of morphological and functional outcomes of mouse sciatic nerve repair with three biodegradable polymer conduits containing poly （lactic acid）[J]. Fernanda Marques Pestana,Rui C.C.Domingues,Júlia Teixeira Oliveira,Daniela F.P.A.Dur?o,Camila Oliveira Goulart,Henrique Rocha Mendon?a,Anne Caroline Rodrigues dos Santos,Natália Tavares de Campos,Beatriz Theodoro da Silva,Cristina Cardoso Pereira,Cristiano Piacsek Borges,Ana Maria Blanco Martinez.  Neural Regeneration Research. 2018(10)
[3]蠶絲在生物醫(yī)用材料領(lǐng)域的應(yīng)用研究[J]. 馬艷,李智,冉瑞龍,李康.  材料導(dǎo)報(bào). 2018(01)
[4]脂多糖干預(yù)對(duì)大鼠周?chē)窠?jīng)損傷后瓦勒變性的影響[J]. 熊樂(lè),張倩,沈若武,邊洪琳,孫廣強(qiáng),王毅,張鳳玉,張蓓.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2017(02)
[5]周?chē)窠?jīng)損傷修復(fù)方法的研究進(jìn)展[J]. 湯佳,謝松林.  嶺南現(xiàn)代臨床外科. 2015(06)
[6]蠶絲絲素材料的生物降解性能[J]. 李明忠,張劍,邱玉華,盧神州.  中國(guó)材料進(jìn)展. 2015(Z1)
[7]周?chē)窠?jīng)導(dǎo)管研究與進(jìn)展[J]. 羅麗花,周毅.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2015(04)
[8]人羊膜促進(jìn)大鼠損傷腓總神經(jīng)功能恢復(fù)[J]. 楊進(jìn),范振海,惠學(xué)玲,馮國(guó)紋,張小雨,萬(wàn)衛(wèi)紅,余麗梅.  中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué). 2013(07)
[9]神經(jīng)導(dǎo)管生物材料的研究與進(jìn)展[J]. 高振,王華,羅曉婷.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(31)
[10]LPS所介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展[J]. 楊一新,李桂源.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(01)



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