脊髓側(cè)索硬化癥（Amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一種致死性的神經(jīng)退行性疾病,目前尚無治愈手段。在確診病例中,90%為散發(fā)性ALS,剩下10%為家族遺傳性。目前已知多種致病基因,其中20%的家族性ALS患者攜帶突變的銅/鋅超氧化物歧化酶（Cu/Zn Superoxide dismutase 1,SOD1）基因,這些患者的運動神經(jīng)元內(nèi)往往有大量突變的SOD1G93A聚集物積累,進而導(dǎo)致運動神經(jīng)元死亡。自噬是細胞對自身多余蛋白質(zhì)和受損細胞器進行吞噬、降解和循環(huán)再利用的過程。在自噬發(fā)生過程中,哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）和腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine 5’-monophosphate（AMP）-activated protein kinase,AMPK）扮演著非常重要的作用。mTOR是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶,它能夠磷酸化ULK1的S757位點,從而抑制自噬體的組裝。而另一方面,AMPK能夠磷酸化激活ULK1的S555位點,從而誘導(dǎo)自噬的發(fā)生。來氟米特是一種免疫抑制劑,廣泛應(yīng)用于治療... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．?Ａ７７?１７２６誘導(dǎo)自嗤的能力

圖１抑制Ｓ６Ｋ１誘導(dǎo)自噻

３．?２?Ａ７７?１７２６?抑制?Ｓ６Ｋ１?激活?ＡＭＰＫ?和?ＵＬＫ１??ＡＭＰＫ可磷酸化ＵＬＫ１Ｓ５５５并引起自噬。在這里，我們分別用５０，１００，?２００ｐＭ?Ａ７７?１７２６??處理ＮＳＣ３４細胞，Ｒａｐａ作為陽性對照。如圖６－Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ａ７７?１７２６對ＡＭＰＫＴ１７２，??ＵＬＫ１Ｓ５５５，?ＡＣＣＳ７９磷酸化表達有著明顯的時間劑量依賴效應(yīng)，隨著Ａ７７?１７２６濃度或作用??時間的增加，ＡＭＰＫＴ１７２，ＵＬＫ１Ｓ５５５，ＵＬＫ１Ｓ７５７和ＡＣＣＳ７９表達也隨之增加，而Ｒａｐａ雖然??對ＵＬＫ１Ｓ５５５和ＡＭＰＫＴ１７２的表達沒有明顯影響，但是抑制了?ＵＬＫ１Ｓ７５７的磷酸化。為了驗??證ＵＬＫ１和ＡＭＰＫ磷酸化激活是否是因為Ａ７７?１７２６抑制了?Ｓ６Ｋ１的活性，分別用Ｓ６Ｋ１??ｓｉＲＮＡ及ＰＦ－４７０８６７１抑制Ｓ６Ｋ１表達，并對處理組細胞內(nèi)相關(guān)蛋白進行Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析。??如圖?６－Ｅ，Ｆ，?Ｇ，Ｈ，與?Ａ７７?１７２６?處理結(jié)果相似，ＡＭＰＫＴＩ７２，?ＵＬＫ１Ｓ５５５，?ＵＬ１Ｓ７５７，?ＡＣＣＳ７９??磷酸化表達均上調(diào)。??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]自噬流的檢測方法[J]. 呂曉希,胡卓偉.  藥學(xué)學(xué)報. 2016(01)



本文編號：3532966