神經(jīng)膠質(zhì)瘤占腦部腫瘤發(fā)病數(shù)的40%左右,是顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤。臨床上傳統(tǒng)治療方法為手術(shù)切除,但因為腦腫瘤部位接近患者的中樞神經(jīng),手術(shù)難以完全清除而易導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)�；熓悄X膠質(zhì)瘤諸多治療環(huán)節(jié)中至關(guān)重要的一環(huán),其成敗直接影響病人的生活質(zhì)量和預(yù)后。然而,由于血腦屏障（blood-brain barrier, BBB）和血瘤屏障（blood-brain tumor barrier, BTB）的存在限制了藥物向膠質(zhì)瘤內(nèi)部的遞送,同時藥物較弱的滲透能力和入胞效率使腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物濃度過低,導(dǎo)致目前臨床化療效果極其不理想。因此有效地增加膠質(zhì)瘤組織中抗腫瘤藥物的濃度,并提高藥物的細(xì)胞內(nèi)化是提高化療藥物療效的關(guān)鍵。針對于此,本課題設(shè)計和構(gòu)建了兩種新型的納米遞釋系統(tǒng)：（1）以可活化（觸發(fā)式）低分子量魚精蛋白（activatable low-molecular-weight protamine, ALMWP）為靶向配體的腫瘤微環(huán)境酶響應(yīng)型藥物遞送系統(tǒng),以期解決吸附介導(dǎo)的膠質(zhì)瘤靶向遞藥系統(tǒng)缺乏細(xì)胞選擇性問題；（2）以MT1-AF7p肽修飾聚乙二醇-聚乳酸（PEG-PLA）納米粒聯(lián)合腫瘤穿透肽iRGD共同注射構(gòu)... 

【文章來源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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目錄
中文摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 可活化低分子量魚精蛋白修飾的聚乙二醇聚己內(nèi)酯納米遞釋系統(tǒng)靶向治療腦膠質(zhì)瘤研究
    第一章 ALMWP-NP-PTX的構(gòu)建和表征
        1. 儀器和試劑
            1.1 儀器
            1.2 材料和試劑
            1.3 溶液的配制
        2. 實驗方法
            2.1 聚合物材料的合成與表征
            2.2 載PTX的ALMWP-NP的制備
            2.3 PTX體外HPLC分析方法的建立
            2.4 載藥量和包封率測定
            2.5 載PTX的ALMWP-NP、LMWP-NP、NP的表征
            2.6 PTX的體外釋放
        3 實驗結(jié)果
            3.1 MPEG-PCL和Maleimide-PEG-PCL的表征
            3.2 PTX體外分析方法的建立
            3.3 載藥量和包封率測定
            3.4 載PTX的ALMWP-NP的表征
            3.5 PTX的體外釋放
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 ALMWP-NP遞藥系統(tǒng)對腦膠質(zhì)瘤靶向性的細(xì)胞水平評價
        1 儀器和試劑
            1.1 儀器
            1.2 材料和試劑
            1.3 溶液的配制
        2 實驗方法
            2.1 載6-香豆素的ALMWP-NP、LMWP-NP和NP的制備與表征
            2.2 6-香豆素體外HPLC分析方法的建立
            2.3 載6-香豆素的ALMWP-NP、LMWP-NP和NP的體外泄漏實驗
            2.4 C6細(xì)胞對NP、LMWP-NP、ALMWP-NP攝取和攝取抑制的定性觀察
            2.5 C6細(xì)胞對NP、LMWP-NP、ALMWP-NP攝取和攝取抑制的定量觀察
            2.6 ALMWP-NP的細(xì)胞內(nèi)吞機(jī)制初步探討
            2.7 ALMWP-NP的體外毒性考察
            2.8 三維腫瘤球模型評價ALMWP-NP的膠質(zhì)瘤靶向性
        3 實驗結(jié)果
            3.1 6-香豆素體外HPLC分析方法的建立
            3.2 載6-香豆素的NP、LMWP-NP和ALMWP-NP的粒徑及Zeta電位
            3.3 載6-香豆素納米粒的體外泄漏實驗
            3.4 C6細(xì)胞對NP、LMWP-NP、ALMWP-NP攝取和攝取抑制
            3.5 ALMWP-NP的細(xì)胞內(nèi)吞機(jī)制初步探討
            3.6 細(xì)胞毒性實驗
            3.7 腫瘤球滲透實驗
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第三章 ALMWP-NP的體內(nèi)藥動學(xué)和組織分布研究
        1 儀器和材料
            1.1 儀器和試劑
            1.2 實驗動物
        2 實驗方法
            2.1 荷C6原位膠質(zhì)瘤裸鼠動物模型的建立
            2.2 荷C6異位腫瘤裸鼠動物模型的建立
            2.3 活體成像觀察載DiR的NP、LMWP-NP、ALMWP-NP在荷C6原位腫瘤裸鼠的體內(nèi)分布
            2.4 Taxol、NP-PTX、LMWP-NP-PTX以及ALMWP-NP-PTX制劑大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究和在荷C6異位腫瘤裸鼠體內(nèi)組織分布的定量分析
        3 實驗結(jié)果
            3.1 活體成像觀察載DiR的NP、LMWP-NP、ALMWP-NP在荷C6原位腫瘤裸鼠的體內(nèi)分布
            3.2 Taxol、NP-PTX、LMWP-NP-PTX以及ALMWP-NP-PTX制劑在大鼠體內(nèi)藥動學(xué)研究
            3.3 Taxol、NP-PTX、LMWP-NP-PTX以及ALMWP-NP-PTX在荷C6異位腫瘤裸鼠的體內(nèi)分布
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第四章 載紫杉醇的ALMWP-NP的藥效學(xué)評價
        1 儀器和材料
            1.1 儀器和試劑
            1.2 實驗動物
            1.3 溶液的配制
        2 實驗方法
            2.1 ALMWP-NP-PTX的體外藥效學(xué)評價
            2.2 ALMWP-NP的體內(nèi)藥效評價
        3 實驗結(jié)果
            3.1 ALMWP-NP-PTX對C6細(xì)胞的毒性作用
            3.2 冰凍切片觀察納米粒在腦膠質(zhì)瘤中的分布
            3.3 Taxol、NP-PTX、LMWP-NP-PTX以及ALMWP-NP-PTX的體內(nèi)抗原位膠質(zhì)瘤效果評價
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
第二部分 MT1-AF7p肽修飾的聚乙二醇聚乳酸納米粒聯(lián)合iRGD肽共給藥用于膠質(zhì)瘤的靶向遞藥研究
    第一章 MT1-NP-PTX的構(gòu)建和表征
        1 儀器和試劑
        2 實驗方法
            2.1 載PTX的MT1-NP和NP的制備與表征
            2.2 PTX體外HPLC分析方法的建立
            2.3 載藥量和包封率測定
            2.4 NP-PTX和MT1-NP-PTX的表征
            2.5 MT1-NP-PTX表面MT1-AF7p共價連接密度的測定
            2.6 PTX的體外釋放
        3 實驗結(jié)果
            3.1 載藥量和包封率測
            3.2 NP-PTX和MT1-NP-PTX的表征
            3.3 MT1-NP-PTX表面MT1-AF7p共價連接密度的測定
            3.4 PTX的體外釋放
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 MT1-NP對腦膠質(zhì)瘤靶向性的細(xì)胞水平評價
        1 儀器和試劑
        2 實驗方法
            2.1 載6-香豆素的MT1-NP和NP的制備與表征
            2.2 6-香豆素體外HPLC分析方法的建立
            2.3 載6-香豆素的MT1-NP和NP的體外泄漏實驗
            2.4 C6細(xì)胞攝取載6-香豆素的MT1-NP和NP的定性觀察
            2.5 C6細(xì)胞攝取載6-香豆素的MT1-NP和NP的定量分析
            2.6 攝取抑制實驗
            2.7 MT1-NP-PTX對C6細(xì)胞毒性考察
            2.8 MT1-NP-PTX對C6細(xì)胞凋亡影響
        3 實驗結(jié)果
            3.1 載6-香豆素的MT1-NP和NP的粒徑及Zeta電位
            3.2 載6-香豆素的MT1-NP和NP的體外泄漏實驗
            3.3 C6細(xì)胞攝取載6-香豆素的MT1-NP和NP的定性觀察
            3.4 攝取抑制實驗
            3.5 MT1-NP-PTX對C6細(xì)胞毒性考察
            3.6 MT1-NP-PTX對C6細(xì)胞凋亡影響
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第三章 MT1-NP對膠質(zhì)瘤靶向性的3D腫瘤球模型評價
        1 試劑與儀器
        2. 實驗方法
            2.1 腫瘤球滲透試驗
            2.2 腫瘤球生長抑制評價
        3 實驗結(jié)果
            3.1 腫瘤球滲透試驗
            3.2 腫瘤球生長抑制評價
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第四章 MT1-NP聯(lián)合iRGD共給藥系統(tǒng)的膠質(zhì)瘤體內(nèi)靶向性評價
        1 儀器和材料
            1.1 儀器和試劑
            1.2 實驗動物
            1.3 溶液的配制
        2 實驗方法
            2.1 荷C6原位膠質(zhì)瘤裸鼠動物模型的建立
            2.2 活體成像示蹤納米粒在荷原位膠質(zhì)瘤裸鼠體內(nèi)的分布
            2.3 冰凍切片觀察納米粒在膠質(zhì)瘤組織中的分布
            2.4 體內(nèi)抗原位膠質(zhì)瘤效果評價
        3 實驗結(jié)果
            3.1 活體成像示蹤納米粒在荷原位膠質(zhì)瘤裸鼠體內(nèi)的分布
            3.2 冰凍切片觀察納米粒在膠質(zhì)瘤組織中的分布
            3.3 體內(nèi)抗原位膠質(zhì)瘤效果評價
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
主要創(chuàng)新點
后繼工作及展望
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]紫杉醇新劑型及研究進(jìn)展[J]. 何伍,劉洋.  世界臨床藥物. 2009(05)
[2]巨胞飲的機(jī)制及功能的研究進(jìn)展[J]. 秦綠葉,劉爽,汪沉然,王均輝,岳鑫,于常海.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2006(01)



本文編號：3531365