目的:探討Toll樣受體4（TLR4）/P38/JNK信號(hào)通路在海馬神經(jīng)元凋亡中的作用及其機(jī)制,為神經(jīng)退行性疾病（ND）的發(fā)病機(jī)制與防治研究提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:采用體外培養(yǎng)7 d的新生大鼠海馬神經(jīng)元,免疫熒光雙標(biāo)法鑒定海馬神經(jīng)元純度。用TLR4配體脂多糖（LPS）或TLR4抗體預(yù)處理海馬神經(jīng)元,以激活或阻斷TLR4的作用。實(shí)驗(yàn)1設(shè)正常對(duì)照組、LPS組及TLR4抗體+LPS組;免疫熒光法檢測P-P38,P-JNK的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)2分為6組:正常對(duì)照組,LPS組,TLR4抗體+LPS組,SB202190（抑制P38）+LPS組,SP600125（抑制JNK）+LPS組,PD98059（抑制ERK）+LPS組;分別用TLR4抗體、P38、JNK及ERK的抑制劑預(yù)處理海馬神經(jīng)元后再給以LPS刺激24 h,Western blot法檢測Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表達(dá)變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測海馬神經(jīng)元凋亡率。結(jié)果:LPS組海馬神經(jīng)元P-P38、P-JNK的表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組（P<0.01）,TLR4抗體+LPS組P-P38,P-JNK表達(dá)顯著低于LPS組（P<... 

【文章來源】：中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2016,32(06)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及純度鑒定
    1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3.1 免疫熒光化學(xué)染色觀察P-P38,P-JNK的表達(dá)
        1.3.2 Western blot
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)及純度鑒定
    2.2 免疫熒光法檢測P-P38、P-JNK的表達(dá)
    2.3 Western blot檢測P-P38、P-JNK的蛋白表達(dá)
    2.4 流式細(xì)胞術(shù)測定抑制TLR4/P38/JNK通路后海馬神經(jīng)元凋亡率
3 討論
    3.1 激活海馬神經(jīng)元TLR4引起凋亡率的增加
    3.2 激活海馬神經(jīng)元TLR4對(duì)P-P38、p-JNK表達(dá)的影響
    3.3 TLR4/p38/JNK信號(hào)通路的激活能降低Bcl-2/Bax、增加Active-caspase-3表達(dá)
    3.4 TLR4/P38/JNK信號(hào)通路參與了海馬神經(jīng)元的凋亡


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Toll-like receptor 4-mediated signaling participates in apoptosis of hippocampal neurons[J]. Yue He,Ailing Zhou,Wei Jiang.  Neural Regeneration Research. 2013(29)
[2]Role of Toll-like receptor 4 in inflammatory reactions of hippocampal neurons[J]. Yae Hu,Jiahui Mao,Yu Zhang,Ailing Zhou.  Neural Regeneration Research. 2013(16)
[3]Oxymatrine reduces neuroinflammation in rat brain A signaling pathway[J]. Jiahui Mao 1 , Yae Hu 1 , Ailing Zhou 1 , Bing Zheng 2 , Yi Liu 3 , Yueming Du 3 , Jia Li 3 , Jinyang Lu 3 , Pengcheng Zhou 3 1 Department of Pathophysiology, Medical School of Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu Province, China 2 Department of Urology, the First People’s Hospital of Nantong, Nantong 226001, Jiangsu Province, China 3 Undergraduate of Medical School of Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu Province, China.  Neural Regeneration Research. 2012(30)
[4]脂多糖聯(lián)合海人藻酸誘導(dǎo)的熱性驚厥導(dǎo)致幼鼠海馬神經(jīng)元凋亡[J]. 施曉容,邵巧燕,劉俊紅,陳余鵬,陳林鶯.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(02)



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