背景:腦卒中是嚴重威脅著人類的生命健康的重大疾病之一。Nurr1是核受體4家族的一個成員。Nurr1在炎癥反應中明顯下調且參與帕金森疾病中神經(jīng)元的死亡。microRNAs在腦缺血再灌注損傷中發(fā)揮重要作用參與多種關鍵因子的轉錄水平的調節(jié)。Nurr1的異常表達與多種信號通路相關有,但miRNA與Nurr1的調節(jié)關系在腦缺血再灌注損傷中幾乎未見報道。目的:本研究目的在于:（1）在體內和體外實驗探索Nurr1在腦缺血再灌注損傷中的表達情況及Nurr1相關的microRNAs;（2）在體內和體外實驗探索Nurr1蛋白的轉錄后調控網(wǎng)絡,及其在活化的膠質細胞的具體作用機制;（3）探究miR-145-5p/Nurr1/TNF-a軸信號在大鼠腦缺血再灌注損傷中的具體功能。方法:（1）原代神經(jīng)元細胞和小膠質細胞培養(yǎng)。（2）神經(jīng)元細胞與小膠質細胞共培養(yǎng)模型建立及OGD/R實驗。（3）大鼠大腦中動脈梗塞再灌注（MCAO/R）模型構建,神經(jīng)功能學結果與梗塞體積分析。（4）RNA提取,逆轉錄和實時定量qPCR。（5）大鼠側腦室注射miR-145-5p mimic和miR-145-5p antagomir。（6）N... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

MCAO模型后，TTC染色

(8)檢測 Nurr1 3’UTR 片段與 miRNA 結合情況的對照實驗分組：第一組 pMIR-質粒不加 Nurr1 3’UTR 片段 + miRNA圖 2 HEK293T 細胞中 miR145-5p 與 Nurr1 3’UTR 片段結合的預實

47圖 4 直接靶向 Nurr1 3′ UTR 的 miRNAs 篩選Figure 4 Screening for miRNAs that directly target the 3′UTR of Nurr1.(A) The infarct volume was negatively correlated with Nurr1 expression some extent byPearson correlation test, but was not statistically significant (correlation coefficient -0.457, P =0.362). (B) Heat map of predicted miRNAs expression in cerebral cortex tissue from sham andMCAO/R animals (one-way ANOVA, p < 0.05). (C) The predicted binding sites of selected miRNA(in green color) to the 3'UTR of Nurr1 (in red color) is mapped in this figure. Nucleotides whichwere altered for mutational studies are marked in gray color of background. (D) Quantitation of th

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Novel splicing variant of the human orphan nuclear receptor Nurr1 gene[J]. 徐評議,樂衛(wèi)東.  Chinese Medical Journal. 2004(06)



本文編號：3523408