背景卒中后抑郁（post-stroke depression,PSD）是腦卒中后最常見的神經(jīng)精神障礙性疾病,影響患者日常生活能力的恢復(fù)及神經(jīng)功能缺損,致殘率及致死率也逐漸升高。機體受到外界應(yīng)激從而激活下丘腦-垂體-腎上腺（hypothalamo-pituitary-adrenal,HPA）軸,下丘腦室旁核處促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（corticotropin-releasing hormone,CRH）短時間內(nèi)以正反饋的方式使促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素受體1（corticotropin-releasinghormonereceptor 1,CRHR1）表達(dá)上調(diào),CRHR1通過與刺激性G蛋白的α亞基（Gs-α）偶聯(lián)來傳遞信號,導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶的刺激,產(chǎn)生第二信使環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphat,cAMP）。cAMP的積累反過來刺激蛋白激酶A（cyclic-AMP dependent protein kinase A,PKA）的激活,使cAMP反應(yīng)元件結(jié)合（cAMP response element binding protein,CREB）蛋白磷酸化,... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗時間流程圖

MCAO手術(shù)簡易圖

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文24進(jìn)行檢測樣品濃度外，余采用5×loadingbuffer進(jìn)行變性，并于100℃煮樣10-15min，晾涼，放入-20℃冰箱中，備用。2.6.2測蛋白濃度（1）稱50mg的BSA放置于1.5mL離心管中，加入無酶水至1mL，充分混勻；取10微升的上述溶液放置于990μL水中，將溶液稀釋至0.5mg/mL;（2）將0.5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋成0.4mg/kg，0.3mg/kg，0.2mg/kg，0.1mg/kg，0.05mg/kg，0.025mg/kg，0mg/kg；（3）將蛋白上清液用雙蒸水稀釋20倍；取一96孔板，將標(biāo)準(zhǔn)品濃度從高到低順序加入，各做一副孔。待測樣品取20μL放入孔中，加入現(xiàn)配的BCA工作液（A液和B液按照A:B=50:1配置）180μL混勻，37℃孵育箱中半小時（加樣時盡量動作輕柔，以防產(chǎn)生氣泡影響蛋白濃度讀數(shù)）。（4）把已孵育的96孔板放入酶標(biāo)儀儀器中，以波長562nm測定其吸光度，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖3示）；40mg/濃度即為上樣體積。圖3蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線圖2.6.3WesternBlot實驗具體步驟（1）SDS-PAGE凝膠配制方法：薄厚玻璃板洗凈擦干后放于烘干箱中，待兩面無明顯水漬后，固定于制膠器上，薄板面向自己。首先用雙蒸水檢驗?zāi)z板是否漏膠，根據(jù)本實驗分子量選用5％濃縮膠和12％分離膠。檢查膠板無漏液，將雙蒸水倒出，并用吸水紙將殘余水吸凈，將配制好的分離膠用1mL槍頭注入玻璃板空隙內(nèi)，每板膠分離膠約為5.0mL，并用無水乙醇覆蓋，直至分離膠完全凝固至一條平穩(wěn)的線。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CREB1、BDNF基因多態(tài)性與河南漢族老年男性卒中后抑郁的關(guān)聯(lián)性分析[J]. 劉柳,劉曉芳,蔣超,王建平.  鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2019(04)
[2]卒中后抑郁影響因素及其與腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子基因多態(tài)性的關(guān)系研究[J]. 何明,馬飛月.  實用心腦肺血管病雜志. 2019(05)
[3]曲唑酮與舍曲林治療抑郁障礙療效和安全性分析[J]. 康選民,李敏.  中國藥物與臨床. 2019(08)
[4]卒中后淡漠綜合征的研究進(jìn)展[J]. 王少朋,趙弘軼,王諾,遲麗屹,黃勇華.  中國腦血管病雜志. 2019(04)
[5]缺血再灌注聯(lián)合慢性不可預(yù)知刺激構(gòu)建卒中后抑郁新模型[J]. 趙兵兵,李濤,王豆,周奇,閆詠梅.  中國組織工程研究. 2019(11)
[6]關(guān)于卒中后抑郁發(fā)病機制的研究新進(jìn)展[J]. 劉增雪,陸靜玨,周一心.  中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2019(02)
[7]卒中后抑郁的危險因素研究進(jìn)展[J]. 馬瑾,楊曉桐,張文睿,王紅星.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2019 (03)
[8]腦卒中后抑郁與血清膽紅素及非高密度脂蛋白膽固醇的關(guān)系[J]. 郭鑫,王靜,路月英,賈娜娜,郭建兵,李賀斌,苑杰.  中國老年學(xué)雜志. 2019(01)
[9]柴胡疏肝散治療卒中后抑郁的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究[J]. 盛蕾,劉元月,胡丹,范琪琪,朱亦誠,張曉浩,凌志香,江雪梅,丁彩霞,肖婧,湯銀燕,李傳游,張?zhí)m坤,李婷婷,朱羽佳,陸茵.  中草藥. 2018(15)
[10]經(jīng)顱直流電刺激對卒中后抑郁的療效[J]. 李泓鈺,王強,王靜,宋魯平.  中國康復(fù)理論與實踐. 2018(05)



本文編號：3511140