研究目的:急性缺血性腦卒中可通過激活炎癥反應(yīng)導(dǎo)致繼發(fā)性腦損傷,進(jìn)而使臨床癥狀進(jìn)一步加重。有研究表明T淋巴細(xì)胞可能在缺血性卒中的進(jìn)展中起重要作用。因此,干預(yù)炎癥反應(yīng)對于缺血再灌注損傷是一種很有潛力的治療方法。大腦中動脈閉塞（MCAO）模型是目前研究腦缺血再灌注損傷的經(jīng)典動物模型,在缺血性腦卒中機(jī)制探索和藥物篩選中得到了廣泛的應(yīng)用。免疫蛋白酶體是蛋白酶體家族中一類特殊的蛋白酶體,可以參與調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病理生理過程和炎癥反應(yīng),雖然已有研究表明它參與缺血性腦卒中的病理過程,但它在缺血性腦卒中中的調(diào)節(jié)作用及作用機(jī)制仍然不十分清楚。PR-957是免疫蛋白酶體LMP7亞基選擇性抑制劑,它具有高度的選擇性和較低的有效藥物濃度等優(yōu)點,已經(jīng)在多種免疫相關(guān)疾病的動物模型中應(yīng)用,能夠改善其癥狀。在本研究中,我們通過改良線栓法建立小鼠大腦中動脈梗塞模型,通過評定小鼠的神經(jīng)功能損害程度、梗死體積、炎性細(xì)胞浸潤、淋巴細(xì)胞分化、炎性因子表達(dá)及其可能相關(guān)的信號通路等方法,來研究PR-957對腦缺血再灌注損傷的作用和可能的機(jī)制,為其治療急性腦梗死提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。研究方法:本研究分析了PR-957在由大腦中動脈... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１不周藥物劑量ＭＣＡＯ的ｍＮＳＳ和腦梗死體積變化??

?天津、醫(yī)科太學(xué)博士學(xué)位論文及信號通路上的關(guān)鍵囡子（ＲＯＲｙｔ）。??（１）?ＲＴ－ＰＣＲ?原理??ＲＴ－ＰＣＲ即反轉(zhuǎn)錄ＰＣＲ，是將ＲＮＡ的反轉(zhuǎn)錄（ＲＴ）和ｃＤＮＡ的聚合酶鏈擴(kuò)增反應(yīng)（ＰＣＲ）相結(jié)含的技術(shù)。首先以從組織或細(xì)胞中提取的ＲＮＡ為模在反轉(zhuǎn)錄酶■?ＲｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ？ＲＴ?ｒｅａｇｅｎｔ作用下，合成ｃＤＮＡ；再以ｃＤＮＡ為板進(jìn)行Ｒｅａｌ?Ｔｉｍｅ擴(kuò)增反應(yīng)。（見圖３）??

（３）蛋白電泳??（一）安裝制膠架，并檢測其密封性??選擇兩個ｌ〇ｍｍ的玻璃板，充分洗凈，最｜ｆ用雙蒸水（ｄｄＨ２〇）沖洗．，晾干。??將兩玻璃板對齊后垂直卡入制膠架（較厚玻璃板位于后側(cè)），將兩板闔定在架子??上，夾緊，為防止漏膠，下方墊好海綿墊，檢測其密封性。??（二）配制ＳＤＳ分離膠??１）用雙蒸水配制１０％過硫酸銨（ＡＰＳ）溶液�。欤恚蹋芄庵糜诒兄�，剩佘的??１０％?ＡＰＳ置于－２０°Ｃ冰箱備用（避免反復(fù)凍融）。??２）配制ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分離膠：制備濃度為１２％的分離膠，按照配置表（見圖４）??分別按比例加入雙蒸水（ｄｄＨ２〇）、３０％的丙烯酰胺、１．５ｍｍｏｌ／ｌ的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１０％??的ＳＤＳ、１０％的ＡＰＳ，加樣過程中用移液槍不斷吹打，使各組分能混合均勻，??最后加入ＡＰＳ和ＴＥＭＥＤ。??


本文編號：3503222