工作目的:血腦屏障是由內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞等構(gòu)成的復(fù)雜結(jié)構(gòu),位于腦實(shí)質(zhì)和血管系統(tǒng)之間。血腦屏障的存在主要是將中樞神經(jīng)系統(tǒng)與外周組織分開。為了維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的穩(wěn)態(tài)平衡。血腦屏障控制著從血液到大腦以及從大腦到血液的物質(zhì)、營養(yǎng)和細(xì)胞轉(zhuǎn)移。包括腦損傷、缺血性中風(fēng)、多發(fā)性硬化癥、癲癇、帕金森病、阿爾茨海默病和重度抑郁癥在內(nèi)的多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病均發(fā)現(xiàn)了血腦屏障破壞的病理學(xué)基礎(chǔ)。血腦屏障完整性的喪失將導(dǎo)致循環(huán)內(nèi)的細(xì)胞因子和免疫細(xì)胞進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng),進(jìn)一步激活神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞并引起細(xì)胞外環(huán)境的改變,對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的功能造成十分嚴(yán)重的破壞。因此,在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中探索一種有效的保護(hù)血腦屏障的方法十分必要,將會(huì)為臨床上的治療提供新的思路進(jìn)而改善患者預(yù)后并減輕其造成的巨大社會(huì)負(fù)擔(dān)。在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病中,組蛋白去乙�；福℉istone deacetylase,HDAC）及組蛋白去乙酸化酶3（Histone deacetylase3,HDAC3）的作用已被發(fā)掘并應(yīng)用。然而不同HDAC亞型,尤其是HDAC3在神經(jīng)系統(tǒng)血腦屏障方面的調(diào)控作用還知之甚少。已知HDAC3在調(diào)控神經(jīng)炎癥和神經(jīng)保護(hù)方面的作用,在多種神經(jīng)... 

【文章來源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１?ＨＢＭＥＣ中ＯＧＤ／Ｒ后促進(jìn)核內(nèi)ＨＤＡＣ３表達(dá)增高并增強(qiáng)核內(nèi)ＨＤＡＣ３的活性

ｃａｄｈｅｒｉｎ的表達(dá)和分布情況。使用免疫熒光我們發(fā)現(xiàn)，相較于正常狀態(tài)，ＯＧＤ／Ｒ損??傷顯著降低了這些蛋白在膜上的表達(dá)水平，而使用５ｕＭ的ＲＧＦＰ９６６處理可以顯著改??善Ｃｌａｕｄｉｎ－５在細(xì)胞膜的表達(dá)（圖２－３?ａ）。進(jìn)一步，我們使用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｓ檢測(cè)蛋白??４２??

丨！?１１１??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＯＧＤ／Ｒ?ＯＧＤ／Ｒ??＋ＲＧＦＰ９６６??圖２－２特異性抑制ＨＤＡＣ３保護(hù)ＨＢＭＥＣ在ＯＧＤ／Ｒ后發(fā)生的通透性完整性損傷。??（ａ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｓ檢測(cè)結(jié)果顯示，使用ＲＧＦＰ９６６特異性抑制ＨＤＡＣ３后，組蛋白??Ｈ３Ｋ９的乙�；皆龈摺＃ǎ猓├茫桑恚幔纾澹受浖䦟�(duì)Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｓ條帶進(jìn)行的灰度測(cè)??定統(tǒng)計(jì)結(jié)果。（ｃ）使用ＲＧＦＰ９６６對(duì)ＨＤＡＣ１－３干預(yù)特異性情況的活性檢測(cè)。（ｄ）??在ＨＢＭＥＣ接受ＯＧＤ／Ｒ模型中，給予ＲＧＦＰ９６６處理并使用ＨＴＣ－ｄｅｘｔｒａｎ對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞??通透性進(jìn)行滲透實(shí)驗(yàn)（ｅ）在ＨＢＭＥＣ接受ＯＧＤ／Ｒ模型中，給予ＲＧＦＰ９６６處理并使??用ＴＥＥＲ實(shí)驗(yàn)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的完整性進(jìn)行檢測(cè)。（ｆ）使用ＷＳＴ－１對(duì)細(xì)胞活性進(jìn)行檢測(cè)??（ｇ）使用ＴＵＮＥＬ實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞凋亡進(jìn)行檢測(cè)。（ｈ）?ＴＵＮＥＬ陽性細(xì)胞定量統(tǒng)計(jì)圖。??ｎ＝４，＊ｐ＜０．０５ｖｓ?ｎｏｒｍａｌ?ｃｏｎｔｒｏｌ，＃ｐ＜０．０５?ｖｓＯＧＤ／Ｒ。??３．３特異性抑制ＨＤＡＣ３可以恢復(fù)ＯＧＤ／Ｒ后緊密連接蛋白Ｃｌａｕｄｉｎ－５的表達(dá)??鑒于緊密連接蛋白對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響，在一共２４小時(shí)的ＯＧＤ／Ｒ損傷后，??我們進(jìn)一步檢測(cè)了緊密連接蛋白ＺＯ－１、Ｃｌａｕｄｉｎ－５和Ｏｃｃｌｕｄｉｎ以及黏著連接蛋白ＶＥ－??ｃａｄｈｅｒｉｎ的表達(dá)和分布情況。使用免疫熒光我們發(fā)現(xiàn)，相較于正常狀態(tài)，ＯＧＤ／Ｒ損??傷顯著降低了這些蛋白在膜上的表達(dá)水平，而使用５ｕＭ的ＲＧＦＰ９６６處理可以顯著改??善Ｃｌａｕｄｉｎ－５在細(xì)胞膜的表達(dá)（圖２－３?ａ）。進(jìn)一步


本文編號(hào)：3499060