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補(bǔ)陽(yáng)還五湯聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦缺血大鼠Notch信號(hào)通路的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-11-07 16:39
  目的:通過(guò)建立大腦中動(dòng)脈閉塞的腦缺血大鼠模型,觀察補(bǔ)陽(yáng)還五湯聯(lián)合BMSCs移植對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、病理學(xué)改變以及對(duì)Notch信號(hào)通路的影響,研究Notch信號(hào)通路在腦缺血之后的變化規(guī)律,探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯和BMSCs移植對(duì)腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用是否與Notch信號(hào)通路有關(guān)系,有望為腦缺血的治療提供一個(gè)新的思路。方法:將動(dòng)物隨機(jī)分為5組,采用線栓法制作大腦中動(dòng)脈閉塞的大鼠模型,分為空白組、模型組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯組、BMSCs移植組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯和BMSCs移植聯(lián)合組。采用全骨髓培養(yǎng)法提取骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,進(jìn)行培養(yǎng)傳代,至細(xì)胞形態(tài)基本變?yōu)榧?xì)長(zhǎng)梭形之后,采用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行鑒定,在移植之前用Brdu進(jìn)行標(biāo)記,通過(guò)尾靜脈移植BMSCs,對(duì)移植組及聯(lián)合組進(jìn)行Brdu-DCX免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè),造模后用Zea-Longa法進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分;HE染色觀察缺血區(qū)的病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法測(cè)定大腦組織缺血部位Notch信號(hào)通路Notch1、Hes1、Jagged1的陽(yáng)性表達(dá)。結(jié)果:(1)神經(jīng)功能缺損評(píng)分結(jié)果:24h時(shí)間點(diǎn),與模型組進(jìn)行比較,聯(lián)合組的評(píng)分降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);7d、1... 

【文章來(lái)源】:陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省

【文章頁(yè)數(shù)】:47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一部分 理論探討
    1 中醫(yī)對(duì)中風(fēng)的認(rèn)識(shí)
        1.1 中醫(yī)對(duì)中風(fēng)的病因病機(jī)認(rèn)識(shí)
        1.2 中醫(yī)藥對(duì)缺血性中風(fēng)的辨證論治
    2 西醫(yī)對(duì)腦缺血的認(rèn)識(shí)
        2.1 腦缺血的發(fā)病機(jī)制
        2.2 西醫(yī)對(duì)腦缺血的治療
    3 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)治療腦缺血的機(jī)制
    4 補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療腦缺血的研究進(jìn)展
    5 Notch信號(hào)通路與腦缺血的關(guān)系
第二部分 實(shí)驗(yàn)部分
    實(shí)驗(yàn)一 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的提取、培養(yǎng)及鑒定
        1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>        2 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        3 實(shí)驗(yàn)方法
            3.1 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的提取
            3.2 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代
            3.3 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的鑒定
            3.4 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植前的標(biāo)記
        4 結(jié)果
            4.1 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)鏡下觀
            4.2 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的鑒定結(jié)果
        5 討論
    實(shí)驗(yàn)二 補(bǔ)陽(yáng)還五湯聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦缺血大鼠Notch信號(hào)通路的影響
        1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>        2 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3 實(shí)驗(yàn)方法
            3.1 動(dòng)物模型建立
            3.2 藥物配制及動(dòng)物分組
            3.3 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植
            3.4 神經(jīng)功能缺損評(píng)分
            3.5 TTC染色步驟
            3.6 灌注、包埋切片制作步驟
            3.7 病理學(xué)(HE染色)步驟
            3.8 免疫組化檢測(cè)步驟
        4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            5.1 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞遷移結(jié)果
            5.2 神經(jīng)功能缺損評(píng)分結(jié)果
            5.3 病理學(xué)(HE)染色的結(jié)果
            5.4 Notch信號(hào)通路分子的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)
        6 討論
        結(jié)論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
在學(xué)期間主要研究成果



本文編號(hào):3482194

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