目的探討靶向沉默髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1（MyT1）對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移、侵襲和黏附的影響和相關(guān)分子機(jī)制。方法設(shè)計(jì)特異性靶向沉默MyT1基因的shRNA,包裝慢病毒后感染人腦膠質(zhì)瘤U-118MG和U-87MG細(xì)胞,qPCR和Western blot檢測兩種細(xì)胞中MyT1的表達(dá)水平,BrdU實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)分別檢測兩種細(xì)胞的遷移、侵襲和黏附能力的變化,qPCR檢測細(xì)胞黏附和腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)水平。結(jié)果在HEK293T細(xì)胞中包裝了特異性靶向MyT1基因的shRNA慢病毒,并成功感染了U-118MG和U-87MG細(xì)胞;兩種細(xì)胞中MyT1 mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著下調(diào)（均P<0.05）,細(xì)胞的遷移、侵襲和黏附能力均有一定程度的降低（均P<0.05）,細(xì)胞黏附相關(guān)基因表達(dá)水平顯著下降,腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá)水平顯著上升（均P<0.05）。結(jié)論靶向沉默MyT1基因?qū)θ四X膠質(zhì)瘤U-118MG和U-87MG細(xì)胞的遷移、侵襲和黏附能力有抑制作用,其機(jī)制可能與調(diào)控細(xì)胞黏附和腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)。MyT1基因的表達(dá),可能是腦膠質(zhì)瘤診療的一個(gè)潛在靶標(biāo)... 

【文章來源】：腫瘤防治研究. 2020,47(10)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

Western blot檢測人正常腦膠質(zhì)細(xì)胞和腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中MyT1的表達(dá)水平

qPCR結(jié)果顯示,與對照組相比,靶向沉默MyT1后U-118MG和U-87MG細(xì)胞中MyT1 mRNA水平分別下降了約85%和90%,見圖2A。Western blot結(jié)果顯示,與對照組相比,U-118MG和U-87MG細(xì)胞中MyT1蛋白水平也顯著降低,見圖2B。這些結(jié)果說明,不論在mRNA水平還是蛋白水平,U-118MG和U-87MG細(xì)胞中MyT1的表達(dá)都發(fā)生了顯著下調(diào)。2.3 靶向沉默MyT1對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力的影響

Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,靶向沉默MyT1后,U-118MG和U-87MG細(xì)胞侵襲穿透基底膜的細(xì)胞數(shù)顯著少于對照組(P=0.015),分別只有對照組的58.0%和60.5%(P=0.022),見圖4。結(jié)果表明,敲低MyT1基因后腦膠質(zhì)瘤U-118MG和U-87MG細(xì)胞的侵襲能力顯著下降。2.5 靶向沉默MyT1對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞黏附能力的影響


本文編號：3464807