第一部分：Clusterin基因沉默對人腦膠質瘤U87細胞增殖、凋亡與侵襲性的影響目的：研究通過慢病毒介導的RNA干擾技術沉默簇集蛋白（clusterin，CLU）的基因表達后，人腦膠質瘤U87細胞的增殖、侵襲及凋亡等生物學行為將會受到怎樣的影響。方法：設計和合成靶向CLU的shRNA序列，并構建到慢病毒的載體plentilox3.7，包被能成功表達各種shRNA載體的慢病毒。將慢病毒感染人腦膠質瘤U87細胞，Real time-PCR檢測CLU、MMP-2和TIMP-2基因mRNA水平，Western Blot技術檢測CLU蛋白表達水平；運用MTT法、流式細胞儀Annexin V/PI及Transwell體外侵襲實驗法評價檢測CLU沉默后，對人腦膠質瘤U87細胞在增殖、凋亡及侵襲能力等方面所造成的影響。結果：特異性針對CLU基因全長mRNA的短發(fā)夾RNA（shRNA）在經過慢病毒包裝后成功感染U87細胞，并在mRNA和蛋白水平上對CLU基因表達產生了特異性的抑制作用；通過MTT結果證實實驗組細胞在sCLU表達受到干擾后，其增殖明顯受抑，與各對照組比較，差異具有統計學意義（P<0... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Real-timePCR測sCLU的mRNA表達Fig1-1ExpressionofsCLUonmRNAleveldetectedbyReal-timePCR

Real-timePCR檢測sCLUmRNA的表達水平

Western-blot檢測sCLU蛋白表達Fig1-3WesternblottinganalysisshowstheexpressionofsCLUprotein

【參考文獻】：
期刊論文
[1]RNAi沉默clusterin基因對卵巢癌SKOV3細胞放射敏感性的影響[J]. 黃鑼,張幸平,陳誠,羅茜,吳永忠.  重慶醫(yī)科大學學報. 2011(11)
[2]Clusterin基因沉默對卵巢癌SKOV3細胞增殖與侵襲的影響[J]. 黃鑼,羅茜,陳誠,張幸平,吳永忠.  第二軍醫(yī)大學學報. 2011(01)
[3]聚集素在前列腺癌細胞不同周期時相的表達[J]. 李學松,周利群,何志嵩,辛殿琪,那彥群,梁云燕,王代樹,郭應祿.  中華泌尿外科雜志. 2006(01)



本文編號：3464193