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沉默Clusterin表達(dá)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞放射敏感性的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-10-29 07:02
  第一部分:Clusterin基因沉默對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖、凋亡與侵襲性的影響目的:研究通過慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)沉默簇集蛋白(clusterin,CLU)的基因表達(dá)后,人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖、侵襲及凋亡等生物學(xué)行為將會(huì)受到怎樣的影響。方法:設(shè)計(jì)和合成靶向CLU的shRNA序列,并構(gòu)建到慢病毒的載體plentilox3.7,包被能成功表達(dá)各種shRNA載體的慢病毒。將慢病毒感染人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞,Real time-PCR檢測CLU、MMP-2和TIMP-2基因mRNA水平,Western Blot技術(shù)檢測CLU蛋白表達(dá)水平;運(yùn)用MTT法、流式細(xì)胞儀Annexin V/PI及Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)法評(píng)價(jià)檢測CLU沉默后,對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞在增殖、凋亡及侵襲能力等方面所造成的影響。結(jié)果:特異性針對(duì)CLU基因全長mRNA的短發(fā)夾RNA(shRNA)在經(jīng)過慢病毒包裝后成功感染U87細(xì)胞,并在mRNA和蛋白水平上對(duì)CLU基因表達(dá)產(chǎn)生了特異性的抑制作用;通過MTT結(jié)果證實(shí)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在sCLU表達(dá)受到干擾后,其增殖明顯受抑,與各對(duì)照組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

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Real-timePCR測sCLU的mRNA表達(dá)Fig1-1ExpressionofsCLUonmRNAleveldetectedbyReal-timePCR

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Real-timePCR檢測sCLUmRNA的表達(dá)水平

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Western-blot檢測sCLU蛋白表達(dá)Fig1-3WesternblottinganalysisshowstheexpressionofsCLUprotein

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]RNAi沉默clusterin基因?qū)β殉舶㏒KOV3細(xì)胞放射敏感性的影響[J]. 黃鑼,張幸平,陳誠,羅茜,吳永忠.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(11)
[2]Clusterin基因沉默對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖與侵襲的影響[J]. 黃鑼,羅茜,陳誠,張幸平,吳永忠.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[3]聚集素在前列腺癌細(xì)胞不同周期時(shí)相的表達(dá)[J]. 李學(xué)松,周利群,何志嵩,辛殿琪,那彥群,梁云燕,王代樹,郭應(yīng)祿.  中華泌尿外科雜志. 2006(01)



本文編號(hào):3464193

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