膠質(zhì)瘤是一類發(fā)生于腦組織和脊髓的腫瘤,主要起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。膠質(zhì)瘤是最主要的成人惡性腦腫瘤,它占全部腦腫瘤和神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的30%,占全部惡性腦腫瘤的80%。高級別的腦膠質(zhì)瘤具有豐富的血管和侵襲浸潤傾向,低級別的腦膠質(zhì)則瘤生長緩慢,可以在不治療的情況下生長很多年,直至出現(xiàn)臨床癥狀。腦膠質(zhì)瘤的治療主要取決于腦膠質(zhì)瘤生長的位置,細(xì)胞類型和腫瘤的惡性程度,手術(shù)治療是腦膠質(zhì)瘤的主要治療方法,輔助運(yùn)用放射治療和化學(xué)治療。由于腦膠質(zhì)瘤具有高侵襲性和富血管性的特點(diǎn)決定了腦膠質(zhì)瘤手術(shù)不能完全切除的特點(diǎn),再加上其對放射治療和化學(xué)治療療效不理想,因此,腦膠質(zhì)瘤至今仍是全身腫瘤中預(yù)后最差的腫瘤之一。因此,研究腦膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)理,尋找新的診斷和治療方法顯得愈發(fā)重要。MicroRNA是一類小的、非編碼RNA分子,廣泛存在于動植物體內(nèi),能在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。人類基因組可以編碼大約1000多種miRNA,這些miRNA靶向近60%的哺乳動物的基因,并且在多種人類細(xì)胞中豐富的表達(dá)。MiRNA參與調(diào)節(jié)生理和病理過程,比如細(xì)胞生長、細(xì)胞周期和凋亡等。異常表達(dá)的miRNA參與了包括腫瘤在內(nèi)的許多疾病的發(fā)生發(fā)展... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-26a促進(jìn)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞克隆形成

的蛋白水平降低近70%,然而抑制miR-26a表達(dá)，使PHB蛋白水平升高3.8倍，如圖6所示。1.00 0.32 1.00 3.88PHB immrn —■：：―G A P D H ■ 'NC 26a NC-I 26a-l圖6:過表達(dá)和抑制表達(dá)miR-26a對PHB蛋白水平的影響。提取穩(wěn)定株U87/miR-NC,U87/miR-26a,U87/miR-NC-I 和 U87/miR-26a-I 的蛋白，并且通過免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測PHB蛋白表達(dá)水平。GAPDH為內(nèi)參。如圖所示：與對照組相比，過表達(dá)miR-26a降低PHB蛋白水平，抑制miR-26a表達(dá)，PHB蛋白水平升高。綜合上述報(bào)告基因檢測和免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PHB是miR-26a的直接祀基因，通過與PHB的mRNA的3’-UTR的一段序列互補(bǔ)配對結(jié)合，miR-26a可以在轉(zhuǎn)錄后水平抑制PHB的表達(dá)。PHB這個(gè)新的紀(jì)基因的發(fā)現(xiàn)，為進(jìn)一步明確miR-26a在腦膠質(zhì)瘤中的功能及其作用的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。四、MiR-26a 激活 PI3K/AKT 和 MAPK/ERK 信號通路

miR-NC miR-26a miR-26a-l圖8: miR-26a誘導(dǎo)的體內(nèi)腫瘤生長。圖8A:將穩(wěn)定細(xì)胞株U87/miR-NC、U87/miR-26a、U87/miR-26a-I細(xì)胞消化、離心并計(jì)數(shù)，然后分別注射入裸鼠兩側(cè)皮下，3xl06細(xì)胞/側(cè)，每組4只裸鼠。腫瘤體積每2天測量一次。和對照組相比，注射miR-26a組的腫瘤組織體積在種瘤第20天起顯著增大，而miR-26a-I組在種瘤第24天腫瘤組織依舊很小。圖8B,種瘤第24天，處死裸鼠取出腫瘤組織稱重并拍照。miR-26a組腫瘤體積明顯大于對照組，而miR-26a-I組腫瘤體積明顯小于對照組，下方柱狀圖是其統(tǒng)計(jì)圖，*和#代表P小于0.05。圖8C：提取了腫瘤組織的RNA,應(yīng)用qRT-PCR的方法檢測了組織中VEGF的mRNA表達(dá)情況。和對照組miR-NC相比


本文編號：3459104