PSD-95參與NR2B介導(dǎo)大鼠神經(jīng)病理性疼痛的脊髓機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-10-25 10:38
研究背景神經(jīng)病理性疼痛是由于軀體感覺(jué)系統(tǒng)的損傷或疾病所引起的疼痛,其臨床特點(diǎn)是在傷害性刺激消失后仍出現(xiàn)痛覺(jué)過(guò)敏、痛覺(jué)超敏或自發(fā)性痛。N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸(NMDA)受體屬于谷氨酸受體,NR2B作為NMDA受體(NMDAR)的一個(gè)重要調(diào)節(jié)亞基,在神經(jīng)病理性疼痛信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起重要作用。突觸后致密物(PSD)是存在于谷氨酸能突觸后膜中的一種特殊結(jié)構(gòu),PSD-95作為突觸后致密物中的重要支架蛋白,在突觸后膜通過(guò)結(jié)構(gòu)域與NMDA受體2B亞基錨定而緊密相連。由于NMDAR的激活與中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的疼痛發(fā)生密切相關(guān),提示PSD-95可能參與NR2B介導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展,但是其作用機(jī)制仍不十分清楚。研究目的本研究擬運(yùn)用疼痛行為學(xué)、免疫熒光染色和蛋白印跡檢測(cè)手段,在大鼠坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(Chronic Constriction Injury,CCI)模型上,探討PSD-95在NR2B介導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生發(fā)展中的作用及其脊髓機(jī)制,為慢性疼痛的防治提供理論依據(jù)。研究方法成功建立Wistar雄性大鼠CCI模型后,于術(shù)后7天取腰膨大段脊髓背角組織,采用免疫印跡(Westernblot)方...
【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1機(jī)械刺激痛閾測(cè)定?
足反應(yīng)閾值即機(jī)械痛閾(Mechanical?threshold,?MT)作為指標(biāo)測(cè)定大鼠后肢足底對(duì)??機(jī)械性刺激的疼痛反應(yīng)。分別于術(shù)前、術(shù)后7天測(cè)定各組大鼠左側(cè)足底機(jī)械痛閾??數(shù)值。術(shù)前的測(cè)定值為機(jī)械痛閾基礎(chǔ)值(見(jiàn)圖1-1)。??采用VonFrey電子測(cè)痛儀測(cè)定各組大鼠后肢機(jī)械痛閾,具體操作步驟如下:??(1)
Iba-1。NeuN是神經(jīng)元的標(biāo)記物,GFAP是星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物,Iba-1是小膠質(zhì)??細(xì)胞的標(biāo)記物。結(jié)果發(fā)現(xiàn),NR2B與NeuN有著良好的共標(biāo),與GFAP和Iba-1無(wú)??共標(biāo),提示NR2B主要表達(dá)在神經(jīng)元(見(jiàn)圖2)。??■圓■??BHWI3?SBBBBi?HHMB??圖2大鼠脊髓背角NR2B表達(dá)的細(xì)胞類(lèi)型。??A?和?Al:?NR2B?與?NeuN?共標(biāo),B?和?Bl:?NR2B?與?GFAP?不共標(biāo),C?和?Cl:?NR2B??與?Iba-1?不共標(biāo)。Scale?bar?=?50?fim。??3.1.2?NR2B與PSD-95的熒光共定位??為檢測(cè)NR2B與PSD-95在大鼠脊髄背角的有無(wú)共定位,我們對(duì)脊髓組織冰凍??切片進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)染色,紅色的信號(hào)是NR2B,綠色信號(hào)是PSD-95。結(jié)果發(fā)??16??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]病理性疼痛的分子機(jī)制[J]. 張旭. 生命科學(xué). 2008(05)
本文編號(hào):3457226
【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1機(jī)械刺激痛閾測(cè)定?
足反應(yīng)閾值即機(jī)械痛閾(Mechanical?threshold,?MT)作為指標(biāo)測(cè)定大鼠后肢足底對(duì)??機(jī)械性刺激的疼痛反應(yīng)。分別于術(shù)前、術(shù)后7天測(cè)定各組大鼠左側(cè)足底機(jī)械痛閾??數(shù)值。術(shù)前的測(cè)定值為機(jī)械痛閾基礎(chǔ)值(見(jiàn)圖1-1)。??采用VonFrey電子測(cè)痛儀測(cè)定各組大鼠后肢機(jī)械痛閾,具體操作步驟如下:??(1)
Iba-1。NeuN是神經(jīng)元的標(biāo)記物,GFAP是星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物,Iba-1是小膠質(zhì)??細(xì)胞的標(biāo)記物。結(jié)果發(fā)現(xiàn),NR2B與NeuN有著良好的共標(biāo),與GFAP和Iba-1無(wú)??共標(biāo),提示NR2B主要表達(dá)在神經(jīng)元(見(jiàn)圖2)。??■圓■??BHWI3?SBBBBi?HHMB??圖2大鼠脊髓背角NR2B表達(dá)的細(xì)胞類(lèi)型。??A?和?Al:?NR2B?與?NeuN?共標(biāo),B?和?Bl:?NR2B?與?GFAP?不共標(biāo),C?和?Cl:?NR2B??與?Iba-1?不共標(biāo)。Scale?bar?=?50?fim。??3.1.2?NR2B與PSD-95的熒光共定位??為檢測(cè)NR2B與PSD-95在大鼠脊髄背角的有無(wú)共定位,我們對(duì)脊髓組織冰凍??切片進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)染色,紅色的信號(hào)是NR2B,綠色信號(hào)是PSD-95。結(jié)果發(fā)??16??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]病理性疼痛的分子機(jī)制[J]. 張旭. 生命科學(xué). 2008(05)
本文編號(hào):3457226
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