目的：體外培養(yǎng)原代人臍帶間充質(zhì)干細胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUMSCs）,并對其進行傳代擴增,觀察及鑒定其生物學(xué)特性,經(jīng)尾靜脈注射移植hUMSCs治療缺血性腦卒中,探討其作用機理并且提供理論依據(jù)及實驗基礎(chǔ)。方法：取足月妊娠健康新生兒臍帶,PBS充分沖洗,剔除臍帶血管及羊膜,將華通膠（Wharton’s jelly）剪碎至1mm3大小,將組織植入培養(yǎng)皿中,在含有10%胎牛血清（fetal bovine senun,FBS）、10ng/ml堿性成纖維生長因子的DMEM/F12中培養(yǎng),觀察細胞形態(tài)變化,細胞融合至80%-90%后原代細胞培養(yǎng)完成,進行消化傳代。收集P5代細胞,流式細胞儀檢測細胞表面表型,包括FITC-CD29、FITC-CD44、FITC-CD34、FITC-CD45、FITC-CD105、 CD106、FITC-HLA-DR等,并以FITC標記的二抗IgG作為同型對照。動物模型：選取左側(cè)大腦中動脈栓塞再灌注模型（Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO）,選取重量250-... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
第一章 人臍帶間充質(zhì)干細胞的體外擴增培養(yǎng)及鑒定
    1.1 前言
    1.2 材料
        1.2.1 主要試劑
        1.2.2 實驗設(shè)備
    1.3 實驗方法
        1.3.1 hUMSCs的原代培養(yǎng)
        1.3.2 hUMSCs的培養(yǎng)擴增
        1.3.3 hUMSCs表面分子標記檢測
        1.3.4 hMSCs細胞的凍存
        1.3.5 復(fù)蘇
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 細胞形態(tài)學(xué)觀察
        1.4.2 hUMSCs表面分子表達特征
        1.4.3 hUMSCs復(fù)蘇
    1.5 討論
    1.6 小結(jié)
第二章 人臍帶間充質(zhì)干細胞移植治療大鼠腦梗死的實驗研究
    2.1 前言
    2.2 實驗動物
    2.3 方法
        2.3.1 實驗動物分組
        2.3.2 術(shù)前準備
        2.3.3 手術(shù)過程
        2.3.4 再灌注
        2.3.5 實驗?zāi)Ｐ蜆藴?br>        2.3.6 腦梗死判定
        2.3.7 細胞移植
        2.3.8 移植后mNSS評分
        2.3.9 腦組織內(nèi)移植細胞觀察
        2.3.10 統(tǒng)計學(xué)方法
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 大鼠造模后神經(jīng)病學(xué)觀察
        2.4.2 MRI檢查
        2.4.3 TTC染色
        2.4.4 CM-Dil標記細胞
        2.4.5 移植后大鼠行為觀察及神經(jīng)功能評分
        2.4.6 熒光染色
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
附圖
附表
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3453688