蛋白聚集體的積累是許多神經(jīng)退行性疾病的典型特征。C9ORF72基因第一個(gè)內(nèi)含子中六個(gè)核苷酸重復(fù)序列GGGGCC（G4C2）的擴(kuò)增是肌萎縮側(cè)索硬化癥（Amyotrophiclateralsclerosis,ALS）和額顳葉癡呆（Frontotemporal dementia,FTD）的最常見原因。攜帶（G4C2）重復(fù)擴(kuò)增的轉(zhuǎn)錄物經(jīng)非ATG依賴性翻譯,產(chǎn)生神經(jīng)毒性二肽重復(fù)蛋白（Dipeptide repeat（DPR）:GR,GA,GP,PR,PA）并促成 ALS/FTD的發(fā)生。但是目前C9orf72-ALS/FTD的疾病外顯率并非100%,提示還有其他機(jī)制共同調(diào)節(jié)其發(fā)病。Ubiquilin2（UBQLN2）是另一種ALS致病基因,我們發(fā)現(xiàn)UBQLN2與GA蛋白聚集體共定位并相互作用,并且UBQLN2對(duì)于GA蛋白聚集體的清除是充分必要的。UBQLN2識(shí)別UBR5介導(dǎo)的GA蛋白聚集體泛素化并通過蛋白酶體和自噬系統(tǒng)清除它。UBQLN2的ALS/FTD病理突變部分喪失了對(duì)GA蛋白聚集體清除的能力。重要的是,外源表達(dá)UBQLN2促進(jìn)了 GA蛋白聚集體的降解,并部分拯救了 GA誘導(dǎo)的神經(jīng)元變性和AL... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１?ＵＢＱＬＮ２蛋白對(duì)ＧＡ聚集體的清除是必須的??２９??

３．３?ＵＢＱＬＮ２病理性突變影響ＧＡ蛋白的清理??突變能導(dǎo)致ＡＬＳ／ＦＴＤ神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生，并且這段序列在不同物??種中保持著高度保守的同源性（圖３Ａ）。為了更好地了解突變是否會(huì)影響??其促進(jìn)ＧＡ蛋白聚集體清理的功能，我們對(duì)？７ＳｇＺ＾２的ＰＸＸ區(qū)的５個(gè)病理性突變位??點(diǎn)進(jìn)一步分析。首先，我們構(gòu)建了不同突變位點(diǎn)的ＵＢＱＬＮ２－Ｆｌａｇ質(zhì)粒，然后將其與??３２??

ＧＦＰ－ＧＡ蛋白聚集體的清理功能，而Ｐ４９７Ｓ，Ｐ５０９Ｓ這兩個(gè)位點(diǎn)突變幾乎不受影響。??有文獻(xiàn)報(bào)道ＵＢＱＬＮ２Ｐ５０６Ｔ突變影響了其與ＨＳＰ７０結(jié)合，導(dǎo)致功能喪失［２８］。我們??通過免疫共沉淀（Ｃｏ－ＩＰ）的方法對(duì)著幾個(gè)位點(diǎn)也進(jìn)行了驗(yàn)證（圖３Ｄ）。從圖中我們??可以看到Ｐ４８７丨，Ｐ５０６Ｔ，?Ｐ５２５Ｓ位點(diǎn)突變的ＵＢＱＬＮ２蛋白與ＨＳＰ７０結(jié)合能力顯著減??弱，而Ｐ４９７Ｓ，Ｐ５０９Ｓ這兩個(gè)位點(diǎn)突變的ＵＢＱＬＮ２蛋白與ＨＳＰ７０的結(jié)合能力沒有明??顯變化。我們可以得出結(jié)論：ＵＢＱＬＮ２需要在ＨＳＰ７０的協(xié)同作用下，才能將泛素化??的ＧＦＰ－ＧＡ蛋白聚集體運(yùn)輸?shù)降鞍酌阁w或自噬系統(tǒng)進(jìn)行降解，Ｐ４８７丨，Ｐ５０６Ｔ，?Ｐ５２５Ｓ??位點(diǎn)突變減弱了?ＵＢＱＬＮ２蛋白與ＨＳＰ７０的結(jié)合能力，導(dǎo)致ＵＢＱＬＮ２蛋白的功能缺失。??Ａ?Ｂ。必＃?分步??Ｐｒｏｔｅａｓｏｍ＾?ＨＳＦ７０?ＵｂｌｑｕＩＵｎ??ｔ＞｜ｎｄｌｎ＜ａ＿??血ｄｊｎＳＬ??ｂｌｎｊ�。睿纾�?？?？?ｉｎｓＧＡ??ｙ－?ｐｓｏｃｓｎ－??＼??Ｔ４？７Ｉ?Ｐ？７ＵＨ？?ＰＭ８８?ｐｓｚｓＢ?、、?ＵＢＱ２－Ｆｌａｇ??■ｏｕｓｅ?ＡＰＣＷＫＶＬ?Ｔ?ｌＩＴＰＶＣＰＶ?Ｉ?［ＣＰＩＣＰＩ?ｆ?－?ｆ?ＣＰＩＣＰＩＣＰＴＧＰＡ?Ｓ?ＣＳＴＣＴＣＩＰＰ?＾??ｒｅｉ?ＴＰＣＷＶＧＶＬ?Ｔ?ｉｉｒＦＡＪＰＶ?Ｉ?１ＧＰ


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