現(xiàn)代社會人口老齡化現(xiàn)象越來越嚴(yán)重,老年性癡呆（senile dementia）、帕金森�。≒arkinson’s disease, PD）、腦卒中等疾病的發(fā)病率都有所升高,此外腦部的感染性疾病如人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）感染造成的癡呆癥等,也嚴(yán)重危害著人類生命。腦部疾病與腦的能量代謝異常有密切關(guān)系,應(yīng)用各種先進技術(shù)研究腦的能量代謝與腦部疾病的關(guān)系已成為當(dāng)今腦部疾病研究的熱點之一。葡萄糖是大腦供能的主要來源之一,也是大腦必需的能量底物,葡萄糖進入腦實質(zhì)后,通過循環(huán)提供能量給神經(jīng)元及其他多種細胞。腦部的能量代謝活動主要是通過葡萄糖的氧化代謝來實現(xiàn)的,葡萄糖的轉(zhuǎn)運依賴于細胞膜上葡萄糖轉(zhuǎn)運體（glucose transporter, GLUT）來完成。另外糖酵解產(chǎn)生的乳酸也可以為大腦供能,乳酸的轉(zhuǎn)運依靠細胞膜上的單羧酸轉(zhuǎn)運體（monocarboxylate transporter, MCT）來完成。研究發(fā)現(xiàn),在血漿葡萄糖正常的時候乳酸優(yōu)先被利用為大腦供應(yīng)能量,與葡萄糖相比乳酸作為腦能量代謝的首選燃料,但是具體的作用機制尚未研究清楚。神... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞培養(yǎng)不同時間的形態(tài)變化??ａ、ｂ、Ｃ?分別為?０、６、９ｄ?（ｘｌＯ）??

微管相關(guān)蛋白２?（ＭＡＰ２）是神經(jīng)元胞體及樹突的標(biāo)志物，ＷＭＡＰ２作為神經(jīng)元??的標(biāo)記對培養(yǎng)第九天的胎鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元純度進巧鑒定，神經(jīng)元胞體及樹突著綠色??（圖２），隨機選取視野中２００個細胞計數(shù)神經(jīng)元純度達９０％Ｗ上。??曲？曲??圖２原代培養(yǎng)的胎鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的免疫焚光染色（。０）??Ｆｉｇｕｒｅ?２．?Ｐｕｒｉｔｙ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏ打?ｏｆ?ｍｏｕｓｅ?ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏｎｓ．?ＤＡＰＩ?ｓｈｏｗｅｄ??ｎｕｃｌｅａｒ?ｗｉｔｈ?ｂｌｕｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ａｎｄ?ＭＡＰ－２?ｓｈｏｗｅｄ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｗｉｔｈ?ｇｒｅｅｎ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ??ｏ打ｌｙ?ｗｉｔｈ?ｂｌｕｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅ打ｔ，?ｂｕｔ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｇｒｅｅ打?ｆｌｕｏｒ巧ｃｅｎｔ?ｗａｓ?ａ?ｎｏｎ－打ｅｕｒｏｎ．??－１６?－??

（三）小ＲＮＡ干擾??免疫印跡（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ，ＷＢ）實驗結(jié)果顯示，用合成的目的片段能夠使所??培養(yǎng)的胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞中的ＴＬ民７基因被沉默（圖３）。??Ｃｔｒｌ?ｒｅ?ａｇｅ?ｎｔ?ｓｉ?ＲＮＡ??雄??ＰＩ?ｎ?■??圖３．?ｓｉＲＮＡ干擾胎請大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的ＴＬＲ７蛋白表達??Ｆｉｇｕｒｅ?３．?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＬ民７?ｐｒｏｔｅｉ打?ｉｎ?ｍｏｕｓｅ?ｅｍｂｒｙｏ打ｉｃ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏ打ｓ?ｗａｓ?ｉｎｔｅ－??ｒｆｅｒｅｄ?ｂｙ?ｓｉＲＮＡ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｏｒ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｓｉＲＮＡ．?Ｔｈｅ?ｐｒｏｌ：ｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ??了Ｌ民７?ｗａｓ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?（ＷＢ）．??（四）ＴＬＲ７／８介導(dǎo)的神經(jīng)元細胞活性變化??ＣＣＫ８實驗數(shù)據(jù)顯示，在Ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ和ＣＬＷ５?（３Ｍ－００２）分別刺激皮質(zhì)神經(jīng)元細胞??一定時間后，神經(jīng)元細胞的活性變化如下：用Ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ刺激皮質(zhì)神經(jīng)元后，在化５ｄ??時細胞的活性無明顯變化，從Ｉｄ到３ｄ刺激組與對照組相比活性有所減低，差異有統(tǒng)??計學(xué)意義（戶＜０．０５，圖４）。當(dāng)ＣＬ０７５?（３Ｍ－００２）與皮質(zhì)神經(jīng)元作用之后，細胞的活性??在第Ｉｄ天就出現(xiàn)明顯的下降（戶＜０．０５，圖５）。當(dāng)用兩種配體分別刺激ＳｉＲＮＡ干擾??后的皮質(zhì)神經(jīng)元細胞后，實驗組同對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（戶＞０．０５，圖６），??表明Ｌｏｘｏｒ化ｉｎｅ和ＣＬ０７５?（３Ｍ－００２）活化ＴＬＲ７／８后可引起神經(jīng)元細胞的活性降低

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Toll樣受體7介導(dǎo)的抗病毒天然免疫反應(yīng)研究進展[J]. 何小兵,房永祥,賈懷杰,陳國華,曾爽,景志忠,程國鋒.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2010(06)
[2]Toll樣受體7在抗感染與自身免疫疾病中的作用[J]. 鄧筠,沈南,王元.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2008(01)



本文編號：3439422