目的:首先,觀察硫化氫供體的表面體征及吸收光譜,檢測硫化氫供體對急性分離海馬神經(jīng)元和人喉癌上皮細胞系Hep-2細胞活性的影響以及光學成像作用;其次,在細胞水平,原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元并鑒定,硫化氫供體與海馬神經(jīng)元共培養(yǎng),無鎂細胞外液處理建立癲癇細胞模型,觀察硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的細胞活性的影響,檢測海馬神經(jīng)元Kir6.2、SUR1 mRNA的表達,深入探討細胞內(nèi)硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的保護作用及機制;最后,在動物水平,建立動物癲癇模型,側(cè)腦室注射硫化氫供體,觀察行為學表現(xiàn)、記錄腦電,免疫組化檢測Kir6.2在海馬及皮層中的表達,檢測皮層及海馬組織中Kir6.2、SUR1蛋白和mRNA的表達,深入探討硫化氫供體對癲癇的抑制作用及機制。方法:第一部分:透射電鏡下觀察硫化氫供體的表征情況,進行硫化氫供體吸收光譜的測定,用CCK-8試劑盒檢測硫化氫供體對原代海馬神經(jīng)元和人喉癌上皮細胞系Hep-2的細胞活性的影響,并篩選出硫化氫供體作用的最大安全濃度和作用時間,用激光共聚焦檢測硫化氫供體在兩種細胞內(nèi)的吸收以及發(fā)光通道情況。第二部分:在細胞水平上,進一步探索硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的作用及機制,原代培... 

【文章來源】： 王林杰 廣州醫(yī)科大學

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠腦部立體定位儀

edition》[44]，如圖1、圖2所示（前囟后0.9 mm，矢狀縫旁開1.6 mm，硬腦膜下4.0 mm）的位置定位，鉆孔，用微量注射器以2 μL/min的速度行側(cè)腦室注射。硫化氫供體干預組、硫化氫供體空白對照組側(cè)腦室注射硫化氫供體 10 uL。注射完成留針10 mins，再緩慢退出，縫合傷口。圖 1 大鼠腦部立體定位儀 圖 2 側(cè)腦室微量注射點（箭頭所指）

2.10 腦電引導電極的植入定位海馬位置（在大腦左側(cè)前囟后 3.8 mm，矢狀縫旁 2.5 mm），鉆開顱骨并穿過硬腦膜，將不銹鋼雙極銅芯電極植入硬膜下 3.0 mm（如圖 3、圖 4 所示）。術(shù)后縫合部分皮膚，以活力碘消毒皮膚預防感染，將大鼠置于屏蔽籠內(nèi)誘導SE模型。引導電極信號通過BL-420生物機能實驗系統(tǒng)記錄海馬腦電變化，觀察癲癇持續(xù)狀態(tài)后 1h 內(nèi)各組大鼠的腦電圖的變化。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3405807