發(fā)布時間：2021-09-23 13:41

　　目的:首先,觀察硫化氫供體的表面體征及吸收光譜,檢測硫化氫供體對急性分離海馬神經(jīng)元和人喉癌上皮細(xì)胞系Hep-2細(xì)胞活性的影響以及光學(xué)成像作用;其次,在細(xì)胞水平,原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元并鑒定,硫化氫供體與海馬神經(jīng)元共培養(yǎng),無鎂細(xì)胞外液處理建立癲癇細(xì)胞模型,觀察硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的細(xì)胞活性的影響,檢測海馬神經(jīng)元Kir6.2、SUR1 mRNA的表達(dá),深入探討細(xì)胞內(nèi)硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用及機(jī)制;最后,在動物水平,建立動物癲癇模型,側(cè)腦室注射硫化氫供體,觀察行為學(xué)表現(xiàn)、記錄腦電,免疫組化檢測Kir6.2在海馬及皮層中的表達(dá),檢測皮層及海馬組織中Kir6.2、SUR1蛋白和mRNA的表達(dá),深入探討硫化氫供體對癲癇的抑制作用及機(jī)制。方法:第一部分:透射電鏡下觀察硫化氫供體的表征情況,進(jìn)行硫化氫供體吸收光譜的測定,用CCK-8試劑盒檢測硫化氫供體對原代海馬神經(jīng)元和人喉癌上皮細(xì)胞系Hep-2的細(xì)胞活性的影響,并篩選出硫化氫供體作用的最大安全濃度和作用時間,用激光共聚焦檢測硫化氫供體在兩種細(xì)胞內(nèi)的吸收以及發(fā)光通道情況。第二部分:在細(xì)胞水平上,進(jìn)一步探索硫化氫供體對海馬神經(jīng)元的作用及機(jī)制,原代培... 

【文章來源】： 王林杰 廣州醫(yī)科大學(xué)

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠腦部立體定位儀

edition》[44]，如圖1、圖2所示（前囟后0.9 mm，矢狀縫旁開1.6 mm，硬腦膜下4.0 mm）的位置定位，鉆孔，用微量注射器以2 μL/min的速度行側(cè)腦室注射。硫化氫供體干預(yù)組、硫化氫供體空白對照組側(cè)腦室注射硫化氫供體 10 uL。注射完成留針10 mins，再緩慢退出，縫合傷口。圖 1 大鼠腦部立體定位儀 圖 2 側(cè)腦室微量注射點(diǎn)（箭頭所指）

2.10 腦電引導(dǎo)電極的植入定位海馬位置（在大腦左側(cè)前囟后 3.8 mm，矢狀縫旁 2.5 mm），鉆開顱骨并穿過硬腦膜，將不銹鋼雙極銅芯電極植入硬膜下 3.0 mm（如圖 3、圖 4 所示）。術(shù)后縫合部分皮膚，以活力碘消毒皮膚預(yù)防感染，將大鼠置于屏蔽籠內(nèi)誘導(dǎo)SE模型。引導(dǎo)電極信號通過BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)記錄海馬腦電變化，觀察癲癇持續(xù)狀態(tài)后 1h 內(nèi)各組大鼠的腦電圖的變化。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]含GDNF基因真核載體的構(gòu)建及其在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 馬猛,陳麗,趙元淑,鄧鎮(zhèn),王林杰,馮雷,羅亞楠,雷水生,朱曉琴.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2015(12)
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[5]氣體信號分子硫化氫在熱性驚厥腦損傷形成機(jī)制中的作用[J]. 韓穎,秦炯,常杏芝,楊志仙,杜軍保,湯秀英.  實用醫(yī)學(xué)雜志. 2006(03)
[6]反復(fù)熱性驚厥前后硫化氫/胱硫醚-β-合成酶體系表達(dá)的改變[J]. 韓穎,秦炯,常杏芝,楊志仙,杜軍保.  北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2005(06)



本文編號：3405807