目的觀察白藜蘆醇（RV）對(duì)帕金森病（PD）小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用,并探索其發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的可能機(jī)制。方法將48只小鼠隨機(jī)分為CON組、MPTP組、RV+MPTP組和EX527+RV+MPTP組,每組12只。腹腔注射MPTP建立PD小鼠模型,并給予RV灌胃、SIRT1特異性抑制劑EX257腹腔注射處理,利用免疫熒光、western blot等檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果給予RV后,與MPTP組相比,RV+MPTP組SIRT1蛋白表達(dá)顯著增加（P<0.001）,p-AMPK蛋白水平顯著升高（P<0.01）,Cleaved caspase 3蛋白水平顯著下降（P<0.01）,小鼠黑質(zhì)區(qū)TH陽性神經(jīng)元丟失率明顯降低,紋狀體組織中TH蛋白表達(dá)顯著增加（P<0.01）。給予EX527后,阻斷了RV的上述作用,p-AMPK蛋白水平顯著降低（P<0.01）,Cleaved caspase 3顯著升高（P<0.01）,小鼠黑質(zhì)區(qū)TH陽性神經(jīng)元丟失率明顯升高,紋狀體組織中TH蛋白表達(dá)顯著下降（P<0.001）。結(jié)論 RV可能通過激活SIRT1/AMPK信號(hào)通路,SIRT1... 

【文章來源】：國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志. 2016,43(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

免疫熒光示小鼠黑質(zhì)區(qū)TH陽性神經(jīng)元

2．2小鼠紋狀體組織中TH、SIＲT1蛋白表達(dá)變化與黑質(zhì)區(qū)免疫熒光結(jié)果類似，與CON組相比，MPTP組小鼠紋狀體組織中TH蛋白顯著下降(P＜0．001)。給予ＲV后，TH蛋白較MPTP組顯著升高(P＜0．01)。給予特異性SIＲT1抑制劑EX527后，TH蛋白較ＲV+MPTP組顯著下降(P＜0．001)。對(duì)各組小鼠紋狀體區(qū)SIＲT1蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果與各組中TH蛋白表達(dá)變化一致。見圖2。圖2小鼠紋狀體組織中TH、SIＲT1蛋白的表達(dá)。A:小鼠紋狀體組織中TH蛋白Westernblot圖譜。B:TH與GAPDH灰度比統(tǒng)計(jì)圖。C:小鼠紋狀體組織中SIＲT1蛋白Westernblot圖譜。D:SIＲT1與GAPDH灰度比統(tǒng)計(jì)圖。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均為與CON組比較;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均為與MPTP組比較;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均為與ＲV+MPTP組比較。2．3小鼠紋狀體組織中AMPK、p-AMPK蛋白表達(dá)變化與CON組相比，MPTP組小鼠紋狀體組織中SIＲT1蛋白表達(dá)顯著減少(P＜0．01)的同時(shí)，p-AMPK蛋白水平顯著下降(P＜0．05)。給予ＲV后，SIＲT1蛋白表達(dá)顯著增多(P＜0．001)的同時(shí)，p-AMPK蛋白水平較MPTP組亦顯著升高(P＜0．01)。給予特異性SIＲT1抑制劑EX527后，SIＲT1蛋白表達(dá)較ＲV+MPTP組顯著減少(P＜0．001)，與此同時(shí)，p-AMPK蛋白水平也較ＲV+MPTP組顯著下降(P＜0．01)。AMPK蛋白表達(dá)在各組之間無顯著差異。這提示激活或抑制SIＲT1影響AMPK磷酸化水平。見圖3。2．4小鼠紋狀體組織中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白表達(dá)變化與CON組相比，MPTP組小鼠紋狀體組織中Cleavedcaspase3蛋白水平顯著升高(P＜0．001)。與MPTP組相比，ＲV+MPTP組Cleavedcaspase3蛋白水平顯著下降(P＜0．01)。給予特異性SIＲT1抑制劑EX527后，與

圖3小鼠紋狀體組織中AMPK、p-AMPK蛋白的表達(dá)。A:小鼠紋狀體組織中AMPK、p-AMPK蛋白Westernblot圖譜。B:AMPK、p-AMPK與GAPDH灰度比統(tǒng)計(jì)圖。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均為與CON組比較;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均為與MPTP組比較;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均為與ＲV+MPTP組比較。圖4小鼠紋狀體組織中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白的表達(dá)。A:小鼠紋狀體組織中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白Westernblot圖譜。B:Caspase3、Cleavedcaspase3與β-actin灰度比統(tǒng)計(jì)圖。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均為與CON組比較;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均為與MPTP組比較;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均為與ＲV+MPTP組比較。3討論P(yáng)D是中老年人中常見的神經(jīng)變性疾�。�15，16］。迄今為止，PD的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，臨床常用的多巴胺制劑僅能緩解運(yùn)動(dòng)癥狀，研究基于分子信號(hào)機(jī)制的延緩或改變PD病程進(jìn)展的神經(jīng)保護(hù)治療具有重要的臨床意義和科學(xué)前景［17］。本研究結(jié)果證實(shí)，ＲV對(duì)MPTP帕金森病小鼠多巴胺能神經(jīng)元具有保護(hù)作用，且該保護(hù)作用與激活SIＲT1/AMPK信號(hào)通路有關(guān)。AMPK是能量代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，因其活性受AMP/ATP比值調(diào)控，被稱作細(xì)胞的“代謝傳感蛋白”或“能量監(jiān)測(cè)器”，AMPK通過調(diào)節(jié)自噬和蛋白降解等穩(wěn)態(tài)機(jī)制來控制體內(nèi)的代謝平衡，維持細(xì)胞能量供求平衡［5］。在熱量限制的情況下，NAD+依賴的去乙�；窼IＲT1水平升高，進(jìn)而延長(zhǎng)生物體的衰老過程，因此，SIＲT1與細(xì)胞的能量代謝同樣存在著密切的關(guān)系［18，19］。這提示AMPK與SIＲT1可能在調(diào)節(jié)能?


本文編號(hào)：3404830