第一部分人腦膠質(zhì)瘤中miR-221和p27的表達(dá)及臨床意義【目的】探討miR-221在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與p27的關(guān)系�！痉椒ā渴占煌±砑�(jí)別膠質(zhì)瘤標(biāo)本,以熒光定量PCR法和免疫印跡法檢測(cè)其中miR-221及p27的表達(dá),分析其與膠質(zhì)瘤病理級(jí)別的關(guān)系�！窘Y(jié)果】 miR-221的表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤惡性程度呈正相關(guān),與p27的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)�！窘Y(jié)論】 miR-221的過(guò)表達(dá)和p27的表達(dá)下降或缺失與膠質(zhì)瘤,尤其是惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。第二部分靶向miR-221siRNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒定【目的】構(gòu)建靶向miR-221的siRNA慢病毒表達(dá)載體,為研究RNAi在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)抑制靶基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)�！痉椒ā扛鶕�(jù)siRNA靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的原則運(yùn)用相關(guān)軟件設(shè)計(jì)靶序列并合成其表達(dá)框,連接入siRNA表達(dá)質(zhì)粒pGCSIL-GFP,同時(shí)構(gòu)建miR-221表達(dá)載體pEGFP-miR-221,共同轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后293T細(xì)胞中Flag蛋白表達(dá),間接反映各靶序列抑制效率�！窘Y(jié)果】重組質(zhì)粒經(jīng)測(cè)序鑒定證明各轉(zhuǎn)錄模板完整、正確插入到相應(yīng)質(zhì)粒中,并篩選出1號(hào)靶序列對(duì)miR... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

不同級(jí)別膠質(zhì)瘤中miR-221的表達(dá)

南京醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文18=9.698 , P =0.006)(圖2) 。圖2 不同級(jí)別膠質(zhì)瘤中的p27表達(dá)三、miR-221與p27的關(guān)系進(jìn)一步分析miR-221與p27表達(dá)之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)兩者間存在一個(gè)負(fù)指數(shù)關(guān)系,即p27=0.2558×0.9143miR-221(圖3)。而且miR-221與p27的表達(dá)量與患者的年齡、性別無(wú)相關(guān)性。

miR-221與p27的表達(dá)關(guān)系

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Gene expression regulators——MicroRNAs[J]. &YIN,Q.James.  Chinese Science Bulletin. 2005(13)
[2]慢病毒載體構(gòu)建及結(jié)構(gòu)優(yōu)化[J]. 李振宇.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2002(05)



本文編號(hào)：3398724