膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中FRAT1與血管新生關(guān)系的研究
發(fā)布時(shí)間：2021-08-30 21:10
目的:膠質(zhì)瘤是一種起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞或前體細(xì)胞的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system,CNS）腫瘤,分別占所有原發(fā)性CNS腫瘤的25.5%和惡性腫瘤的80.8%,其中最常見、惡性程度和致死性最高的原發(fā)性腫瘤是多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）,雖然近年來(lái)對(duì)GBM的治療取得了很大的進(jìn)展,但是患者的預(yù)后依舊不樂觀。在GBM中,血管新生對(duì)疾病的發(fā)展以及預(yù)后有重要意義,它是實(shí)質(zhì)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的必要條件。作為血管新生最主要的調(diào)節(jié)因子,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是治療血管新生疾病的重要靶標(biāo)。貝伐單抗是靶向VEGF的單克隆抗體,已經(jīng)被美國(guó)食品藥物管理局（Food and Drug Administration,FDA）批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)性GBM。但是在臨床應(yīng)用中,貝伐單抗只能延長(zhǎng)患者的無(wú)進(jìn)展生存期,卻對(duì)總生存期的改善沒有明顯效果。尋找新的標(biāo)志物并采用聯(lián)合治療方案可能會(huì)改善GBM患者的治療效果。研究表明Wnt/β-catenin信號(hào)通路在生理性和病理性的血管新生過(guò)程中發(fā)...
【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省
【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
U251細(xì)胞中FRAT1mRNA的表達(dá)水平
山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13測(cè)U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度，如圖2-2-C所示，與siNC組進(jìn)行對(duì)比，siFRAT1組U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度明顯降低（P<0.001），這一結(jié)果與Westernblot和real-timePCR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相一致。這些結(jié)果表明敲低FRAT1可顯著抑制U251細(xì)胞中VEGF的表達(dá)。圖2-2siNC/siFRAT1U251細(xì)胞中VEGF的表達(dá)水平。采用Westernblot、real-timePCR以及ELISA技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，圖A示siFRAT1組VEGF蛋白的表達(dá)水平較siNC組明顯降低；圖B示siFRAT1組VEGFmRNA的表達(dá)水平較siNC組明顯減少（**P<0.01）；圖C示U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度在siFRAT1組中較siNC組顯著降低（***P<0.001）。2.3內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)證實(shí)敲低FRAT1可抑制HUVECs的血管新生能力在手術(shù)切除的人腦膠質(zhì)瘤組織中，F(xiàn)RAT1的表達(dá)與血管新生呈正相關(guān)[23]。說(shuō)明FRAT1可能在膠質(zhì)瘤組織中參與血管新生的調(diào)節(jié)，但是目前尚沒有針對(duì)這兩個(gè)因子的相關(guān)研究。在本研究中，通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)FRAT1的下調(diào)是否會(huì)影響HUVECs的成管能力。將siNC/siFRAT1U251細(xì)胞中收集的上清液作為HUVECs的培養(yǎng)基培養(yǎng)6小時(shí)，然后檢查細(xì)胞成管情況（圖2-3）。圖2-3-A示siFRAT1組細(xì)胞的上清液明顯抑制了HUVECs的成管能力；圖2-3-B示siFRAT1組HUVECs的相對(duì)管腔長(zhǎng)度較siNC組顯著減少（P<0.01）。這些結(jié)果表明敲低U251細(xì)胞中FRAT1的表達(dá)可顯著抑制HUVECs的血管新生。
山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14圖2-3收集U251細(xì)胞的上清液培育HUVECs進(jìn)行內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)。HUVECs在上清液中培育6h后檢測(cè)成管能力，圖A示siFRAT1組內(nèi)皮細(xì)胞的管樣結(jié)構(gòu)較siNC組明顯減少；圖B示2組樣本中管樣結(jié)構(gòu)的相對(duì)長(zhǎng)度，siFRAT1組較siNC組明顯降低（**P<0.01）。
本文編號(hào)：3373509
【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省
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【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
U251細(xì)胞中FRAT1mRNA的表達(dá)水平
山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13測(cè)U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度，如圖2-2-C所示，與siNC組進(jìn)行對(duì)比，siFRAT1組U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度明顯降低（P<0.001），這一結(jié)果與Westernblot和real-timePCR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相一致。這些結(jié)果表明敲低FRAT1可顯著抑制U251細(xì)胞中VEGF的表達(dá)。圖2-2siNC/siFRAT1U251細(xì)胞中VEGF的表達(dá)水平。采用Westernblot、real-timePCR以及ELISA技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，圖A示siFRAT1組VEGF蛋白的表達(dá)水平較siNC組明顯降低；圖B示siFRAT1組VEGFmRNA的表達(dá)水平較siNC組明顯減少（**P<0.01）；圖C示U251細(xì)胞上清液中VEGF的濃度在siFRAT1組中較siNC組顯著降低（***P<0.001）。2.3內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)證實(shí)敲低FRAT1可抑制HUVECs的血管新生能力在手術(shù)切除的人腦膠質(zhì)瘤組織中，F(xiàn)RAT1的表達(dá)與血管新生呈正相關(guān)[23]。說(shuō)明FRAT1可能在膠質(zhì)瘤組織中參與血管新生的調(diào)節(jié)，但是目前尚沒有針對(duì)這兩個(gè)因子的相關(guān)研究。在本研究中，通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)FRAT1的下調(diào)是否會(huì)影響HUVECs的成管能力。將siNC/siFRAT1U251細(xì)胞中收集的上清液作為HUVECs的培養(yǎng)基培養(yǎng)6小時(shí)，然后檢查細(xì)胞成管情況（圖2-3）。圖2-3-A示siFRAT1組細(xì)胞的上清液明顯抑制了HUVECs的成管能力；圖2-3-B示siFRAT1組HUVECs的相對(duì)管腔長(zhǎng)度較siNC組顯著減少（P<0.01）。這些結(jié)果表明敲低U251細(xì)胞中FRAT1的表達(dá)可顯著抑制HUVECs的血管新生。
山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14圖2-3收集U251細(xì)胞的上清液培育HUVECs進(jìn)行內(nèi)皮細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)。HUVECs在上清液中培育6h后檢測(cè)成管能力，圖A示siFRAT1組內(nèi)皮細(xì)胞的管樣結(jié)構(gòu)較siNC組明顯減少；圖B示2組樣本中管樣結(jié)構(gòu)的相對(duì)長(zhǎng)度，siFRAT1組較siNC組明顯降低（**P<0.01）。
本文編號(hào)：3373509
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