目的：1.搜集人腦膜瘤術(shù)后標(biāo)本進(jìn)行原代培養(yǎng)并鑒定。2. Her2siRNA慢病毒轉(zhuǎn)染人腦膜瘤細(xì)胞，觀察轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的增殖活性和生物學(xué)行為的改變。方法：1.在神經(jīng)外科術(shù)后搜集新鮮的腦膜瘤組織，經(jīng)過原代和傳代培養(yǎng)后獲得的腦膜瘤細(xì)胞，在對數(shù)生長期用免疫組化法和FISH法對其進(jìn)行鑒定。2.將Her2siRNA慢病毒載體轉(zhuǎn)染到人腦膜瘤細(xì)胞中，倒置顯微鏡在1-4天4個時間點(diǎn)觀察病毒的表達(dá)，確定最佳感染復(fù)數(shù)（MOI）。3.實驗分為三組：①Control組：用含10-15%血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人的腦膜瘤細(xì)胞；②M ock組：感染空載體的腦膜瘤細(xì)胞；③Her2siRNA組：感染了Her2siRNA慢病毒的腦膜瘤細(xì)胞。4.慢病毒感染72小時后，用CCK-8法檢測各組腦膜瘤細(xì)胞的增殖抑制率；同時應(yīng)用RT-PCR法檢測Her2/neu基因的表達(dá)情況；Western blot法檢測Her2、VEGF和Ki-67蛋白的表達(dá)情況。5.將各組細(xì)胞接種至裸鼠腋下檢測成瘤情況。結(jié)果：1.搜集新鮮的人腦膜瘤術(shù)后標(biāo)本，進(jìn)行原代培養(yǎng)，在10%DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)下，貼壁后呈多角形生長。2.由上海漢恒股份有限公司建立Her2s... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人腦膜瘤細(xì)胞生長特點(diǎn)（A:×200B:×200）

圖 3-2 人腦膜瘤細(xì)胞免疫組化的表達(dá)（EMA:×200 Vim:×200）Fig.3-2 human meningioma cells expression in immunohistochemistry（EMA:×200 Vim:×200）2.2 人腦膜瘤組織的 FISH 檢測切片上橘紅色信號代表 Her2 的基因信號，綠色信號代表 17 號染色體著絲粒

代表 Her2 的基因信號，綠色信號代表 挑選，20-30 個腫瘤細(xì)胞核的雙色信號號總數(shù)比值≥2.2、部分區(qū)域眾多信號連擴(kuò)增；若部分區(qū)比值介于 1.8-2.2 之間，（如圖 3-3）。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3366699