短暫性腦缺血對小鼠海馬區(qū)神經(jīng)發(fā)生及Cystatin C表達的影響
發(fā)布時間：2021-08-26 21:18
目的利用小鼠急性全腦缺血模型觀察急性腦缺血對海馬神經(jīng)發(fā)生及Cystatin C表達的影響。方法將C57BL/6雄性小鼠（68周）隨機分為腦缺血組和假手術(shù)組。采用雙側(cè)頸動脈結(jié)扎法建立短暫性全腦缺血模型;利用HE染色觀察腦缺血后不同時間（1周,2周）海馬區(qū)形態(tài)學(xué)變化;采用免疫組織熒光染色觀察缺血后海馬區(qū)cleave-caspase-3表達變化;利用EdU染色觀察缺血3 d、1周、2周和4周后,海馬區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞增殖變化;利用免疫組織熒光染色觀察缺血3 d、1周、2周和4周后,海馬區(qū)nestin、GFAP及少突膠質(zhì)細(xì)胞特異蛋白（OSP）等蛋白表達變化,判斷腦缺血對海馬區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響。利用免疫組織熒光染色觀察缺血3 d、1周和2周后,海馬區(qū)Cystatin C表達變化以及Cystatin C在海馬區(qū)不同細(xì)胞類型中的變化。結(jié)果腦缺血1周后,小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)目減少,cleave-caspase-3陽性細(xì)胞增加（P<0.05）。海馬DG區(qū)EdU陽性細(xì)胞數(shù)量在缺血3 d后開始增加（P<0.05）,缺血1周后達到峰值（P<0.05）;海馬CA1區(qū)Ed...
【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：59 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
顯微止血夾夾閉C57BL/6小鼠雙側(cè)頸總動脈
分離心包膜，暴露心臟，在心尖部剪出一個微小的液針從小口處進針，經(jīng)左心室穿入升主動脈并用血管夾固定，使剪一個小口，開放靜脈血，以生理鹽水經(jīng)升主動脈先快速滴注沖心耳流出后，再減速滴注，以清除整個循環(huán)中血細(xì)胞；待右心耳血液流出，觀察肝臟顏色變成茶色后，改用4％多聚甲醛（pH7.4進行緩慢灌注，為確認(rèn)多聚甲醛是否經(jīng)過小鼠體液循環(huán)，過程中劇烈抽動為灌注準(zhǔn)確，待小鼠軀干及尾巴僵硬強直后灌注完畢。處剪下頭部，撥開頭皮，暴露顱骨，用咬骨鉗剝離顱骨取出腦組保證腦組織的完整，將取出的小鼠腦組織快速置于有4%多聚甲醛（圖2），4℃冰箱進行后固定。
寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 第一部分 短暫性腦缺血對 C57BL/6 小鼠海馬區(qū)神經(jīng)發(fā)生的影響結(jié)果1、腦缺血后海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)特點HE 染色鏡下可見正常組（假手術(shù)組）海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞排列緊密、多層，形態(tài)無明顯病理學(xué)改變（Fig. 4A）。缺血再灌注 1 周后，小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)顯著減少；部分剩余細(xì)胞失去正常形態(tài)結(jié)構(gòu)，表現(xiàn)為細(xì)胞核染色加深，凝集，出現(xiàn)了核固縮、核溶解；胞質(zhì)消失；可見嗜酸性細(xì)胞（Fig. 4B）。缺血 2 周組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目與正常組相比，無明顯差別（Fig. 4C），表現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞大小形態(tài)正常。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]星形膠質(zhì)細(xì)胞對腦缺血后神經(jīng)元保護機制的研究進展[J]. 張歡歡,劉寒,何林,高原雪,代旭陽,張曉雙,李敏,王斌. 山東醫(yī)藥. 2017(36)
[2]康復(fù)治療對老年血管性癡呆患者療效及認(rèn)知功能障礙的影響分析[J]. 李婷,宗麗春,任彩麗. 山西醫(yī)藥雜志. 2016(21)
[3]電針對大鼠腦缺血灶周圍區(qū)少突膠質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及蛋白表達的影響[J]. 羅燕,廖金玲,馮楓,雷麗萍,許能貴. 針刺研究. 2015(03)
[4]血清胱抑素C檢測在ICU急性腎損傷中的意義[J]. 鄒德勇,耿紅艷,王秀梅,趙怡雯,張小麗,翁澤兵,劉蘭蘭,趙海濱,郭曉今,劉向祎. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2012(07)
[5]局灶性腦缺血后室管膜 /室下區(qū)細(xì)胞遷移到梗塞區(qū)周圍并分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞（英文）[J]. 張蓬勃,劉勇,李捷,康前雁,田英芳,陳新林,趙建軍,石秦東,宋土生,錢亦華. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2005(10)
[6]大鼠擬“血管性癡呆”模型的改進[J]. 王蕊,楊秦飛,唐一鵬,房良敏,胡京紅,賈緒東,洪慶濤. 中國病理生理雜志. 2000(10)
碩士論文
[1]腦缺血大鼠室管膜下區(qū)和大腦皮層細(xì)胞增殖與巢蛋白表達[D]. 沈紅衛(wèi).青島大學(xué) 2006
本文編號：3364986
【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：59 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
顯微止血夾夾閉C57BL/6小鼠雙側(cè)頸總動脈
分離心包膜，暴露心臟，在心尖部剪出一個微小的液針從小口處進針，經(jīng)左心室穿入升主動脈并用血管夾固定，使剪一個小口，開放靜脈血，以生理鹽水經(jīng)升主動脈先快速滴注沖心耳流出后，再減速滴注，以清除整個循環(huán)中血細(xì)胞；待右心耳血液流出，觀察肝臟顏色變成茶色后，改用4％多聚甲醛（pH7.4進行緩慢灌注，為確認(rèn)多聚甲醛是否經(jīng)過小鼠體液循環(huán)，過程中劇烈抽動為灌注準(zhǔn)確，待小鼠軀干及尾巴僵硬強直后灌注完畢。處剪下頭部，撥開頭皮，暴露顱骨，用咬骨鉗剝離顱骨取出腦組保證腦組織的完整，將取出的小鼠腦組織快速置于有4%多聚甲醛（圖2），4℃冰箱進行后固定。
寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 第一部分 短暫性腦缺血對 C57BL/6 小鼠海馬區(qū)神經(jīng)發(fā)生的影響結(jié)果1、腦缺血后海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)特點HE 染色鏡下可見正常組（假手術(shù)組）海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞排列緊密、多層，形態(tài)無明顯病理學(xué)改變（Fig. 4A）。缺血再灌注 1 周后，小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)顯著減少；部分剩余細(xì)胞失去正常形態(tài)結(jié)構(gòu)，表現(xiàn)為細(xì)胞核染色加深，凝集，出現(xiàn)了核固縮、核溶解；胞質(zhì)消失；可見嗜酸性細(xì)胞（Fig. 4B）。缺血 2 周組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目與正常組相比，無明顯差別（Fig. 4C），表現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞大小形態(tài)正常。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]星形膠質(zhì)細(xì)胞對腦缺血后神經(jīng)元保護機制的研究進展[J]. 張歡歡,劉寒,何林,高原雪,代旭陽,張曉雙,李敏,王斌. 山東醫(yī)藥. 2017(36)
[2]康復(fù)治療對老年血管性癡呆患者療效及認(rèn)知功能障礙的影響分析[J]. 李婷,宗麗春,任彩麗. 山西醫(yī)藥雜志. 2016(21)
[3]電針對大鼠腦缺血灶周圍區(qū)少突膠質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及蛋白表達的影響[J]. 羅燕,廖金玲,馮楓,雷麗萍,許能貴. 針刺研究. 2015(03)
[4]血清胱抑素C檢測在ICU急性腎損傷中的意義[J]. 鄒德勇,耿紅艷,王秀梅,趙怡雯,張小麗,翁澤兵,劉蘭蘭,趙海濱,郭曉今,劉向祎. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2012(07)
[5]局灶性腦缺血后室管膜 /室下區(qū)細(xì)胞遷移到梗塞區(qū)周圍并分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞（英文）[J]. 張蓬勃,劉勇,李捷,康前雁,田英芳,陳新林,趙建軍,石秦東,宋土生,錢亦華. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2005(10)
[6]大鼠擬“血管性癡呆”模型的改進[J]. 王蕊,楊秦飛,唐一鵬,房良敏,胡京紅,賈緒東,洪慶濤. 中國病理生理雜志. 2000(10)
碩士論文
[1]腦缺血大鼠室管膜下區(qū)和大腦皮層細(xì)胞增殖與巢蛋白表達[D]. 沈紅衛(wèi).青島大學(xué) 2006
本文編號：3364986
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