發(fā)布時(shí)間：2021-08-25 11:25

　　研究背景神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs）的發(fā)現(xiàn)為許多伴有神經(jīng)元丟失的神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供新的治療途徑。然而,NSCs來源是目前研究面臨的一大難題�，F(xiàn)對外源性神經(jīng)干細(xì)胞來源的研究主要關(guān)注體細(xì)胞誘導(dǎo)的NSCs,因其誘導(dǎo)周期短,且不經(jīng)過多能干細(xì)胞階段致瘤性低,是目前安全高效的神經(jīng)干細(xì)胞來源。其中用小分子化合物（SM）對特定細(xì)胞通路的抑制或激活,使體細(xì)胞誘導(dǎo)為神經(jīng)干細(xì)胞,安全性高,是目前最具研究前景的神經(jīng)干細(xì)胞來源。本研究通過文獻(xiàn)閱讀和前期預(yù)實(shí)驗(yàn),篩選出7種小分子化合物,但發(fā)現(xiàn)其共同作用會引起細(xì)胞大量死亡。故結(jié)合體細(xì)胞重編程為NSCs的規(guī)律和SM作用通路的特點(diǎn),以及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們在不同階段采用不同的SM,以減少每階段SM的使用和提高誘導(dǎo)效率獲得階段小分子化合物誘導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞（SMSINS）。此外,在誘導(dǎo)方案探索階段,我們發(fā)現(xiàn)丙戊酸（VPA）,作為誘導(dǎo)方案中其中一種小分子化合物,其在增強(qiáng)NSCs誘導(dǎo)效率和神經(jīng)元分化方面顯示出最顯著的作用,可能與VPA對mTOR信號通路的激活有關(guān)。因此,我們提出研究假設(shè):VPA明顯提高誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞（iNSCs）誘導(dǎo)效率,使iNSCs能更好向神經(jīng)元分化,可能與mTOR信號的... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１原代提�。停牛疲蟮奶卣�

天細(xì)胞出現(xiàn)中心聚集現(xiàn)象，且細(xì)胞數(shù)逐漸增多，形成細(xì)胞巢團(tuán)狀聚集中心（圖??ｌｂ）。誘導(dǎo)１０天結(jié)束后將ＳＭＳＩＮＳ細(xì)胞接種在ＰＤＬ／Ｌ孵育過的培養(yǎng)板上，用ＮＳＣｓ??標(biāo)志蛋白Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２行免疫熒光檢測（圖２ｂ－ｃ）。為了更好比較ＳＭＳＩＮＳ的??神經(jīng)干細(xì)胞特點(diǎn)，遂從胚胎小鼠腦中分離天然ＮＳＣｓ細(xì)胞，作為本實(shí)驗(yàn)的陽性對??照，將誘導(dǎo)的ＳＭＳＩＮＳ細(xì)胞的特點(diǎn)與其對比。為了進(jìn)一步定量分析誘導(dǎo)ＳＭＳＩＮＳ??細(xì)胞的神經(jīng)干性特征，用流氏細(xì)胞學(xué)（ＦＡＣＳ）的方法檢測ＳＭＳＩＮＳ細(xì)胞和ＮＳＣｓ??的Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２的表達(dá)，結(jié)果顯示天然ＮＳＣｓ的Ｎｅｓｔｉｎ表達(dá)略高于ＳＭＳＩＮＳ，??但其Ｓｏｘ２表達(dá)略低于ＳＭＳＩＮＳ?（圖２ｄ）。??２３??

圖３?ＳＭＳＩＮＳ具有類似ＮＳＣｓ的特征

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的調(diào)控[J]. 樓瓊,王曉梅.  醫(yī)學(xué)綜述. 2017(18)
[2]TGF-β信號傳導(dǎo)通路及其生物學(xué)功能[J]. 劉镕,趙琴平,董惠芬,蔣明森.  中國病原生物學(xué)雜志. 2014(01)



本文編號：3362028