發(fā)布時(shí)間：2021-08-21 10:03

　　目的:研究周?chē)窠?jīng)體外預(yù)變性的新方法,以便在短期內(nèi)獲得大量高效許旺細(xì)胞,觀察其組建的組織工程化神經(jīng)對(duì)坐骨神經(jīng)缺損再生效果。方法:許旺細(xì)胞培養(yǎng):6-8周齡清潔級(jí)C57BL/6小鼠骨髓源細(xì)胞（BMDCs）與其坐骨神經(jīng)體外共培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)A組,無(wú)BMDCs介入的坐骨神經(jīng)體外培養(yǎng)為對(duì)照B組。培養(yǎng)7d后行大體觀察,復(fù)合酶消化預(yù)變后的神經(jīng)片段,行許旺細(xì)胞培養(yǎng)。將兩組許旺細(xì)胞配成濃度為1x10/ml。組織工程化神經(jīng)的體外組建及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、建模:分別組建許旺細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)-聚乳酸管（PLA）的組織工程化神經(jīng)。隨機(jī)把40只6-8周齡清潔級(jí)C57BL/6小鼠分成4組,每組10只。建立小鼠坐骨神經(jīng)缺損模型,坐骨神經(jīng)保持5mm缺損。將A、B組許旺細(xì)胞配成濃度為1x10/ml,組建許旺細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)-聚乳酸管（組織工程化神經(jīng)）,修復(fù)C57BL/6小鼠5mm坐骨神經(jīng)缺損模型,建立小鼠A、B組模型。同時(shí)建立C組（細(xì)胞外基質(zhì)-聚乳酸管修復(fù)5mm坐骨神經(jīng)缺損）和自體神經(jīng)移植D組（切斷坐骨神經(jīng),倒置端端外膜縫合）。檢測(cè)指標(biāo):坐骨神經(jīng)體外培養(yǎng)大體觀察;許旺細(xì)胞數(shù)量和純度大致觀察。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建模后12周行大體觀測(cè)、電生理檢查... 

【文章來(lái)源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

長(zhǎng)6mm、內(nèi)徑為0.6mm、厚為0.1mm的聚乳酸（PLA）神經(jīng)導(dǎo)管

腓總、脛神經(jīng)端）以近 3mm 處切除向心側(cè) 5mm 長(zhǎng)的神經(jīng)片段，倒置端端縫合，建立自體神經(jīng)移植的 D 組（見(jiàn)圖 2.2）。在放大 10 倍的顯微鏡下用 10-0 無(wú)創(chuàng)線間斷縫合組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管（或自體神經(jīng)）與神經(jīng)外膜，要求無(wú)張力，神經(jīng)纖維乳突無(wú)外露，共縫合 4 針。4-0 慕絲線逐層進(jìn)行縫合，手術(shù)完畢。觀察照看手術(shù)后的 C57BL/6 小鼠，設(shè)置空調(diào)為 26℃，注意保暖，側(cè)臥位休息，必要時(shí)觸碰術(shù)后的C57BL/6 小鼠，防止 C57BL/6 小鼠因麻醉過(guò)深死去。待小鼠完全清醒后予以飼料和飲用水，A、B、C、D 四組 C57BL/6 小鼠術(shù)后 12 周進(jìn)行功能檢測(cè)及組織切片檢查。注：A 組為實(shí)驗(yàn)組，許旺細(xì)胞為坐骨神經(jīng)片段與骨髓源細(xì)胞(BMDCs)共培養(yǎng)獲得的。B、C、D 三組為對(duì)照組。B 組的許旺細(xì)胞是坐骨神經(jīng)僅在許旺細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)，無(wú)骨髓源細(xì)胞(BMDCs)參與。C 組為細(xì)胞外基質(zhì)-聚乳酸管，無(wú)許旺細(xì)胞組建。D 組為自體神經(jīng)移植（切取 5mm 坐骨神經(jīng)，倒置端端縫合）。

腓總、脛神經(jīng)端）以近 3mm 處切除向心側(cè) 5mm 長(zhǎng)的神經(jīng)片段，倒置端端縫合，建立自體神經(jīng)移植的 D 組（見(jiàn)圖 2.2）。在放大 10 倍的顯微鏡下用 10-0 無(wú)創(chuàng)線間斷縫合組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管（或自體神經(jīng)）與神經(jīng)外膜，要求無(wú)張力，神經(jīng)纖維乳突無(wú)外露，共縫合 4 針。4-0 慕絲線逐層進(jìn)行縫合，手術(shù)完畢。觀察照看手術(shù)后的 C57BL/6 小鼠，設(shè)置空調(diào)為 26℃，注意保暖，側(cè)臥位休息，必要時(shí)觸碰術(shù)后的C57BL/6 小鼠，防止 C57BL/6 小鼠因麻醉過(guò)深死去。待小鼠完全清醒后予以飼料和飲用水，A、B、C、D 四組 C57BL/6 小鼠術(shù)后 12 周進(jìn)行功能檢測(cè)及組織切片檢查。注：A 組為實(shí)驗(yàn)組，許旺細(xì)胞為坐骨神經(jīng)片段與骨髓源細(xì)胞(BMDCs)共培養(yǎng)獲得的。B、C、D 三組為對(duì)照組。B 組的許旺細(xì)胞是坐骨神經(jīng)僅在許旺細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)，無(wú)骨髓源細(xì)胞(BMDCs)參與。C 組為細(xì)胞外基質(zhì)-聚乳酸管，無(wú)許旺細(xì)胞組建。D 組為自體神經(jīng)移植（切取 5mm 坐骨神經(jīng)，倒置端端縫合）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]人工神經(jīng)預(yù)構(gòu)的研究進(jìn)展[J]. 何繼銀,勞杰.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2005(09)
[7]小腸粘膜下層（SIS）橋接周?chē)窠?jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 蘇琰,張長(zhǎng)青,孫魯源,張曄,曾炳芳.  中華創(chuàng)傷骨科雜志. 2004(10)



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