β-淀粉樣蛋白 1-42 促進(jìn)α-突觸核蛋白聚集的機制研究
發(fā)布時間:2021-08-12 05:45
第一部分Aβ1-42對細(xì)胞內(nèi)α-syn表達(dá)、聚集、降解的影響及與Calpain-1的關(guān)系目的:通過轉(zhuǎn)染人α-突觸核蛋白(α-synuclein, α-syn)A53T突變基因的PC12細(xì)胞(A53T-PC12細(xì)胞)模型,探討β-淀粉樣蛋白1-42片段(Amyloid-β1-42,Aβ1-42)對細(xì)胞內(nèi)α-syn表達(dá)、聚集、降解的影響,及可能的機制。方法:予Aβ1-42干預(yù)A53T-PC12細(xì)胞,采用MTT法檢測細(xì)胞活性改變,觀察細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(Reactive oxygen species, ROS)水平變化;并予Aβ1-42和常用抗氧化劑維生素C(Vitamin C, VitC)同時干預(yù)(Aβ1-42+VitC)細(xì)胞,觀察VitC對Aβ1-42介導(dǎo)的損傷是否有拮抗作用。特異性α-syn抗體及硫磺素S(Thioflavin S,ThS)雙重免疫熒光染色直接觀察Aβ1-42、Aβ1-42+VitC干預(yù)后細(xì)胞內(nèi)a-syn聚集情況。通過Western blot半定量檢測不同干預(yù)后細(xì)胞內(nèi)a-syn表達(dá)及聚集的改變,同時觀察細(xì)胞內(nèi)Calpain-1水平變化,并分析a-syn聚集體量與Calp...
【文章來源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 Aβ_(1-42)對細(xì)胞內(nèi)α-syn表達(dá)、聚集、降解的影響及與Calpain-1的關(guān)系
材料和方法
實驗結(jié)果
討論
第二部分 Aβ_(1-42)對細(xì)胞內(nèi)α-syn磷酸化的影響及與CK2的關(guān)系
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3337708
【文章來源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 Aβ_(1-42)對細(xì)胞內(nèi)α-syn表達(dá)、聚集、降解的影響及與Calpain-1的關(guān)系
材料和方法
實驗結(jié)果
討論
第二部分 Aβ_(1-42)對細(xì)胞內(nèi)α-syn磷酸化的影響及與CK2的關(guān)系
材料與方法
實驗結(jié)果
討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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