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Cav1不同表達對U87膠質瘤細胞的影響以及細胞外ATP對U87膠質瘤侵襲和遷移研究

發(fā)布時間:2021-08-07 19:39
  一、研究背景及目的:膠質瘤(glioma)是人顱內最常見的腫瘤,其生物學特性中最重要的特點是腫瘤細胞侵入到正常腦組織,圍繞在原發(fā)灶周圍形成所謂的“衛(wèi)星腫瘤灶”,而且常要侵襲腦的重要功能區(qū),由于沒有合理的切實可行的辨認腫瘤邊界的方法或者技術,因此一直以來手術切除腫瘤的程度很有限,而且術后腫瘤復發(fā)的幾率隨著病理級別的升高而升高,更為可怕的是人腦膠質瘤中的大約50%左右是膠質母細胞瘤(glioblastoma),它們的特性是侵襲性強、復發(fā)時間短、預后差,F(xiàn)代計算機斷層掃描、術前MRI(核磁共振)等影像技術仍難以準確的確定腫瘤邊界,即使術中使用了普通顯微鏡,但是放大倍數(shù)還很有限,仍然難以辨認腫瘤界限,而且殘留的腫瘤細胞即使僅占1mm3體積細胞數(shù)目將達到109個,因此,研究膠質瘤侵襲性生長的機制對于臨床治療膠質瘤患者有著重要的意義。本課題旨在探討惡性膠質瘤侵襲機制的宏觀層面為出發(fā)點,研究了Cav1(Caveolin-1)、細胞外三磷酸腺苷(Adenosine Triphosphate,ATP)在腦膠質瘤侵襲性生長和遷移中的作用。分析了Cav1不同表達在U87膠質瘤中生長和侵... 

【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

Cav1不同表達對U87膠質瘤細胞的影響以及細胞外ATP對U87膠質瘤侵襲和遷移研究


陽性克隆產(chǎn)物Pf"R

倒置顯微鏡,細胞,人腦膠質瘤,表調


圖 1 倒置顯微鏡下觀察復蘇后的細胞(×200)7 人腦膠質瘤細胞系中 Cav1 表達情況有明確了 U87 人腦膠質瘤細胞系中,Cav1 是否呈陽性表調節(jié) U87 人腦膠質瘤中 Cav1 的表達。免疫組化實驗結果胞中 Cav1 呈陽性表達(圖 2)。

腦膠質瘤細胞,慢病毒,顆粒感,熒光顯微鏡


第三軍醫(yī)大學碩士學位論文后熒光顯微鏡下觀察慢病毒上報告基因 GFP 的表達情況,感染時間達到 7 天后收集細胞蛋白進行 Western Blot 檢測實驗,進而判斷目的基因表達效果。結果顯示,感染 3天后,U87 腦膠質瘤細胞可表達綠色熒光,感染效率均大于 90%(圖 3)。感染時間達到7 天后 Western-blot 檢測 U87 腦膠質瘤細胞中 Cav1 表達情況顯示,U87-NC、U87-siCav1以及 U87-Cav1 慢病毒顆粒感染 U87 腦膠質瘤細胞后 GFP 均有表達,U87-siCav1 慢病毒顆粒感染 U87 腦膠質瘤細胞后有效降低了 Cav1 表達,U87-Cav1 感染 U87 腦膠質瘤細胞后明顯提高了 Cav1 蛋白水平(圖 4)。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]甲基-β-環(huán)糊精干擾脂質微區(qū)影響腦膠質瘤細胞系C6侵襲和遷移的體外研究[J]. 李飛,李梅,盧佳友,朱剛,林江凱,孟輝,吳南,陳志,馮華.  中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2008(05)



本文編號:3328410

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