目的本研究分析了3例PCDH19相關(guān)早期嬰兒癲癇性腦病患者的臨床和遺傳學(xué)特征,旨在對(duì)進(jìn)一步理解女性癲癇和精神發(fā)育遲滯提供更廣闊的視角（EFMR;MIM 300088）。方法以3例10個(gè)月～2歲的早期嬰兒癲癇性腦病患者為研究對(duì)象,所有患兒按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行神經(jīng)系統(tǒng)檢查和腦電圖監(jiān)測(cè),并分別采集每位患兒及其父母兩毫升靜脈血進(jìn)行相關(guān)疾病基因檢測(cè):包括神經(jīng)系統(tǒng)疾病檢測(cè)包,癲癇及相關(guān)發(fā)作性疾病檢測(cè)包。利用PCR技術(shù)和測(cè)序技術(shù),對(duì)捕獲基因的外顯子區(qū)和剪切位點(diǎn)進(jìn)行突變檢測(cè),利用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)和測(cè)序技術(shù),檢測(cè)“癲癇及相關(guān)發(fā)作性疾病”或神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)的基因外顯子和剪切位點(diǎn)。先通過二代測(cè)序技術(shù)檢出變異,再用一代測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果我們描述了3位癲癇患者中PCDH19基因的三個(gè)變異,通過一個(gè)多基因癲癇包的外顯子測(cè)序,在一位嵌合男性和兩位不相關(guān)的女性中檢出了3個(gè)PCDH19基因突變。這些變異包括1個(gè)移碼突變c.1508＿1509insT（p.Thr504HisfsTer19）、1個(gè)錯(cuò)義突變c.1681C>T（p.Pro561Ser）、1個(gè)無義突變c.918C>G（p.Tyr306Ter）。在... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：40 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

家系1的PCDH19基因的遺傳圖譜和突變序列色譜圖

結(jié)果11圖2.家系2的PCDH19基因的遺傳圖譜和突變序列色譜圖。注：黑色圓圈攜帶突變的女性患者；白色圓圈無PCDH19突變的女性；白色方塊無PCDH19突變的男性。紅色箭頭指示突變所在位置。病人3臨床外顯子測(cè)序在患者3的PCDH19基因中發(fā)現(xiàn)1個(gè)無義突變：c.918C>G的雜合核苷酸變異，即編碼區(qū)中的核苷酸從C為G，導(dǎo)致306號(hào)Tyr的密碼子變?yōu)榻K止密碼子（p.Tyr306Ter），導(dǎo)致肽鏈合成提前終止。其父親的此位點(diǎn)為半合子，母親PCDH19基因未發(fā)現(xiàn)上述變異。（圖3）。圖3.家系3的PCDH19基因的遺傳圖譜和突變序列色譜圖。注：黑色圓圈攜帶突變的女性患者；白色圓圈無PCDH19突變的女性；白色方塊中的小圓點(diǎn)攜帶PCDH19基因突變的無癥狀男性。

H19基因第1號(hào)外顯子中的3個(gè)突變。無義突變c.918C>G(p.Tyr306Ter)在EC3區(qū)域。移碼突變c.1508_1509insT(p.Thr504HisfsTer19)和錯(cuò)義突變c.1681C>T(p.Pro561Ser)都在EC5區(qū)域(圖4)。在我們的報(bào)告中，這個(gè)無義突變和錯(cuò)義突變被預(yù)測(cè)為有害，且以前曾有報(bào)道[15]。雖然移碼變異是新發(fā)現(xiàn)的，但c.1508_1509insT的移碼性質(zhì)和p.Thr504HisfsTer19引入的終止密碼子被預(yù)測(cè)是有害的。此外，6個(gè)EC鈣黏蛋白重復(fù)序列的胞外結(jié)構(gòu)域在氨基酸序列中是高度保守的，是正常蛋白質(zhì)功能的關(guān)鍵。因此，我們的研究為這些突變的病理提供了進(jìn)一步的證據(jù)。圖4.PCDH19基因點(diǎn)突變示意圖。SP：信號(hào)肽。EC：胞外鈣黏蛋白結(jié)構(gòu)域。Tm：跨膜結(jié)構(gòu)域。CM1和CM2：胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域1和2。總之，我們報(bào)道了早期嬰兒癲癇性腦病相關(guān)的PCDH19基因的三個(gè)突變。在這三個(gè)突變中，一個(gè)變異存在于1名嵌合男性，且是新發(fā)現(xiàn)的變異。一個(gè)錯(cuò)義變異是新生變異，是第二例報(bào)道的女性病例。一個(gè)無義變異是父系遺傳，是第一次被報(bào)道于女性患者。我們的報(bào)道為這種特殊類型癲癇的分子遺傳學(xué)診斷提供了進(jìn)一步的證據(jù)和新的觀點(diǎn)。或許更有意義的是，在這名嵌合男性患者中新發(fā)現(xiàn)的突變將擴(kuò)大目前對(duì)早期嬰兒癲癇性腦病（EIEE9）的認(rèn)識(shí)，并指導(dǎo)男性患者的診斷和靶向治療。最后，本研究存在明顯的局限性，例如樣本量相對(duì)較校然而，本研究為今后進(jìn)一步研究PCDH19基因相關(guān)的早期嬰兒癲癇性腦病開辟了一個(gè)新的領(lǐng)域。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]KCNQ2突變相關(guān)嬰幼兒癲癇的臨床及遺傳學(xué)分析[J]. 謝涵,屈曉旋,張?jiān)氯A,張雨佳,孔瑋晶,高凱,劉曉燕,吳曄,楊艷玲,吳希如,姜玉武.  中華實(shí)用兒科臨床雜志. 2019 (12)



本文編號(hào)：3323550