目的:研究轉錄因子MRTF-A誘導自噬緩解腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)細胞損傷的相關分子機制。方法:1、慢病毒感染腦室最佳條件摸索:（1）35只SD大鼠隨機均分為7組:對照組,高表達5、7、9天組,抑制表達5、7、9天組。按1.6×10⁶TU/只注射劑量,對照組注射慢病毒空載體,高表達組注射高表達MRTF-A慢病毒,抑制表達組注射抑制表達MRTF-A慢病毒。注射后分別在第5、7、9天取腦組織,Western blot檢測MRTF-A表達水平,確定慢病毒感染腦室的最佳時間。（2）20只SD大鼠隨機均分為4組:對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。對照組注射慢病毒空載體（1.6×10⁶TU/只）,低、中、高劑量組分別按0.8×10⁶TU/只、1.6×10⁶TU/只、2.4×10⁶TU/只注射高表達MRTF-A慢病毒。7天后取腦組織做冰凍切片,觀察MRTF-A的熒光表達水平,確定慢病毒注射最佳劑量。（3）20只SD大鼠隨機均分為4組:對照組、P1組（前囟后1.72mm,矢狀縫旁開1mm,深度... 

【文章來源】：武漢科技大學湖北省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

MRTFs家族蛋白及主要功能區(qū)及主要結合區(qū)域[9]

慢病毒感染時間對MRTF-A蛋白表達的影響

武漢科技大學碩士學位論文12圖3慢病毒注射劑量對MRTF-A的熒光表達水平的影響。N.S.P＞0.05，*P＜0.05或**P＜0.01，vsSham，n=5。3.3LV-MRTF-A注射位點效應關系SD大鼠分別在右側大腦注射位點P1（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開1mm，深度2.6mm）、注射位點P2（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）、注射位點P3（前囟后0.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）注射高表達MRTF-A慢病毒（1.6×106TU/只），注射后第7天取腦進行冰凍切片，用顯微鏡玻片掃描儀觀察MRTF-A表達水平。結果顯示：慢病毒注射后逐漸擴散至全腦（圖4A），MRTF-A熒光表達水平顯著高于假手術組（P＜0.05）；P1、P2與P3組間MRTF-A表達水平無顯著差異（P＞0.05）（圖4B）。結合腦缺血再灌注模型的損傷部位，后續(xù)實驗選擇慢病毒的注射位點為：P2（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）。圖4慢病毒注射位點對MRTF-A的熒光表達水平的影響。紅色箭頭表示注射位點，N.S.P＞0.05，**P＜0.01，vsSham，n=5。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3305624