目的:研究轉(zhuǎn)錄因子MRTF-A誘導(dǎo)自噬緩解腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)細(xì)胞損傷的相關(guān)分子機(jī)制。方法:1、慢病毒感染腦室最佳條件摸索:（1）35只SD大鼠隨機(jī)均分為7組:對照組,高表達(dá)5、7、9天組,抑制表達(dá)5、7、9天組。按1.6×10⁶TU/只注射劑量,對照組注射慢病毒空載體,高表達(dá)組注射高表達(dá)MRTF-A慢病毒,抑制表達(dá)組注射抑制表達(dá)MRTF-A慢病毒。注射后分別在第5、7、9天取腦組織,Western blot檢測MRTF-A表達(dá)水平,確定慢病毒感染腦室的最佳時間。（2）20只SD大鼠隨機(jī)均分為4組:對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。對照組注射慢病毒空載體（1.6×10⁶TU/只）,低、中、高劑量組分別按0.8×10⁶TU/只、1.6×10⁶TU/只、2.4×10⁶TU/只注射高表達(dá)MRTF-A慢病毒。7天后取腦組織做冰凍切片,觀察MRTF-A的熒光表達(dá)水平,確定慢病毒注射最佳劑量。（3）20只SD大鼠隨機(jī)均分為4組:對照組、P1組（前囟后1.72mm,矢狀縫旁開1mm,深度... 

【文章來源】：武漢科技大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

MRTFs家族蛋白及主要功能區(qū)及主要結(jié)合區(qū)域[9]

慢病毒感染時間對MRTF-A蛋白表達(dá)的影響

武漢科技大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3慢病毒注射劑量對MRTF-A的熒光表達(dá)水平的影響。N.S.P＞0.05，*P＜0.05或**P＜0.01，vsSham，n=5。3.3LV-MRTF-A注射位點(diǎn)效應(yīng)關(guān)系SD大鼠分別在右側(cè)大腦注射位點(diǎn)P1（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開1mm，深度2.6mm）、注射位點(diǎn)P2（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）、注射位點(diǎn)P3（前囟后0.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）注射高表達(dá)MRTF-A慢病毒（1.6×106TU/只），注射后第7天取腦進(jìn)行冰凍切片，用顯微鏡玻片掃描儀觀察MRTF-A表達(dá)水平。結(jié)果顯示：慢病毒注射后逐漸擴(kuò)散至全腦（圖4A），MRTF-A熒光表達(dá)水平顯著高于假手術(shù)組（P＜0.05）；P1、P2與P3組間MRTF-A表達(dá)水平無顯著差異（P＞0.05）（圖4B）。結(jié)合腦缺血再灌注模型的損傷部位，后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇慢病毒的注射位點(diǎn)為：P2（前囟后1.72mm，矢狀縫旁開2mm，深度2.6mm）。圖4慢病毒注射位點(diǎn)對MRTF-A的熒光表達(dá)水平的影響。紅色箭頭表示注射位點(diǎn)，N.S.P＞0.05，**P＜0.01，vsSham，n=5。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3305624