目的1.觀察慢性MPTP帕金森病小鼠模型炎癥反應(yīng)的病理情況。2.評價優(yōu)化核酸疫苗（pVAX1-IL-4/SYN-B）預(yù)防接種對小鼠MPTP損害的神經(jīng)保護作用。3.探討優(yōu)化核酸疫苗免疫對MPTP帕金森病小鼠模型炎癥反應(yīng)的影響特點，進一步評價優(yōu)化核酸疫苗預(yù)防免疫的有效性和安全性。方法抽取并制備足量pVAX1-IL-4/SYN-B和pVAX1。將C57BL/6正常小鼠隨機分為正常對照組、PBS模型組、空質(zhì)粒模型組、優(yōu)化核酸疫苗模型組4組，分別在小鼠雙后肢脛前肌肌注PBS、PBS、空質(zhì)粒、pVAX1-IL-4/SYN-B各100ul進行預(yù)防免疫，共免疫3次。末次注射3周后，后3組背部皮下注射MPTP構(gòu)建慢性帕金森病小鼠模型，正常對照組注射同體積的PBS。末次給藥后觀察小鼠行為學變化；免疫組織化學、Western blot檢測小鼠黑質(zhì)部TH、CD11b、 COX-2表達情況；RT-PCR檢測小鼠黑質(zhì)TNF-α、IL1-β炎癥因子mRNA水平。結(jié)果1.在預(yù)防免疫接種階段，未發(fā)現(xiàn)小鼠行為異常。但在采用MPTP構(gòu)建帕金森病小鼠模型過程中，各模型組小鼠出現(xiàn)尾巴上翹、僵硬，肢體抖動、強直，活動減少、緩慢，... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

自由活動實驗測得各組小鼠行為學結(jié)果.Fig1.BehaviorresultsofeachgroupofmicewithOpen-fieldtest.

(29.00±2.34)TH 陽性細胞數(shù)較正常對照組減少了 23.68% ，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但優(yōu)化核酸疫苗模型組與PBS模型組、空質(zhì)粒模型組比較，TH陽性細胞數(shù)明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05) (圖2)。在小鼠腦切片黑質(zhì)部位正常對照組幾乎無CD11b、COX-2陽性細胞；PBS模型組和空質(zhì)粒模型組可見較多散在或成簇分布的陽性細胞侵潤，染色較深，主要見于胞漿和胞膜；而優(yōu)化核酸疫苗模型組中CD11b、COX-2陽性細胞較PBS模型組和空質(zhì)粒模型組明顯減少，散在稀疏分布(圖3、圖4)。采用Image-Pro Plus軟件進行圖像分析測量CD11、COX-2積分光密度值(integral optical density)，優(yōu)化核酸疫苗模型組與正常對照組、PBS模型組和空質(zhì)粒模型組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，PBS模型組和空質(zhì)粒模型組與正常對照組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，PBS模型組和空質(zhì)粒模型組差異無統(tǒng)計學意義，(P 0.05)。

組和空質(zhì)粒模型組可見較多散在或成簇分布的陽性細胞侵潤，染色較深，主要見于胞漿和胞膜；而優(yōu)化核酸疫苗模型組中CD11b、COX-2陽性細胞較PBS模型組和空質(zhì)粒模型組明顯減少，散在稀疏分布(圖3、圖4)。采用Image-Pro Plus軟件進行圖像分析測量CD11、COX-2積分光密度值(integral optical density)，優(yōu)化核酸疫苗模型組與正常對照組、PBS模型組和空質(zhì)粒模型組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，PBS模型組和空質(zhì)粒模型組與正常對照組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，PBS模型組和空質(zhì)粒模型組差異無統(tǒng)計學意義，(P 0.05)。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3278680