Wnt與NF-κB信號通路在調(diào)控LPS刺激的BV2細胞炎癥的機制研究
發(fā)布時間:2021-06-26 14:07
[目的]研究wnt/β-catenin信號通路和NF-κB信號通路對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)株BV2細胞炎癥的調(diào)控機制,探討其在神經(jīng)炎癥中的作用。[方法]用含有5%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM高糖型完全培養(yǎng)液,置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BV2細胞。選擇生長狀態(tài)良好、生長密度適中的細胞,隨機分為:①空白對照組(Control組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),不作任何處理;②LPS處理組(LPS組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),加入1ug/mlLPS處理細胞不同時間(0.5h、1h,2h,4h,6h);③抑制劑組(LPS+XAV939組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),加入1mMXAV939預(yù)處理細胞6h,緊接著用1ug/mlLPS處理細胞1h。分別用RT-PCR方法檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、環(huán)氧酶-2(COX-2)等炎性相關(guān)因子表達情況;用蛋白免疫印跡(Western Blotting)方法檢測β-鏈蛋白(β-catenin)、磷酸化的核因子-κB(p-NF-κ...
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1?LPS刺激BV2細胞不同時間后TNF-a和COX-2的表達
LPS?at?different?time?LPS?at?different?time??圖2?LPS刺激BV2細胞不同時間后p-catenin、p-IkB和p-NF-KB的表達。圖2a??為相應(yīng)的曝光后western?blotting結(jié)果圖。用image?J掃描條帶灰度后得到相應(yīng)的??強度值,用目的蛋白強度值/P-actin的強度值來進行標(biāo)準(zhǔn)化處理。圖2b為??P-catenin/p-actin?的強度值,圖?2c?為?p-NF-KB/p-actin?的強度值,圖?2d?為??p-lKB/p-actin的強度值。每項實驗均采用隨機分組并重復(fù)三次以上,結(jié)果用均數(shù)??±標(biāo)準(zhǔn)誤(X土S)表示。**表示與空白對照組相比,尸<0.001,*表示與空白對照組??相比,P<0.05,兩組之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。??28??
:??圖3?XAV939預(yù)處理后LPS刺激BV2細胞產(chǎn)生的TNF-a和COX-2表達水平。圖??3a為相應(yīng)的mRNA結(jié)果圖。圖3b為C0X-2/GAPDH的強度值,圖3c為??TNF-a/GAPDH的強度值。圖3d為免疫熒光結(jié)果圖,紅色熒光標(biāo)記的蛋白為??30??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Role of the Wnt/β-catenin pathway in gastric cancer: An indepth literature review[J]. Miguel Angel Chiurillo. World Journal of Experimental Medicine. 2015(02)
本文編號:3251486
【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:55 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1?LPS刺激BV2細胞不同時間后TNF-a和COX-2的表達
LPS?at?different?time?LPS?at?different?time??圖2?LPS刺激BV2細胞不同時間后p-catenin、p-IkB和p-NF-KB的表達。圖2a??為相應(yīng)的曝光后western?blotting結(jié)果圖。用image?J掃描條帶灰度后得到相應(yīng)的??強度值,用目的蛋白強度值/P-actin的強度值來進行標(biāo)準(zhǔn)化處理。圖2b為??P-catenin/p-actin?的強度值,圖?2c?為?p-NF-KB/p-actin?的強度值,圖?2d?為??p-lKB/p-actin的強度值。每項實驗均采用隨機分組并重復(fù)三次以上,結(jié)果用均數(shù)??±標(biāo)準(zhǔn)誤(X土S)表示。**表示與空白對照組相比,尸<0.001,*表示與空白對照組??相比,P<0.05,兩組之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。??28??
:??圖3?XAV939預(yù)處理后LPS刺激BV2細胞產(chǎn)生的TNF-a和COX-2表達水平。圖??3a為相應(yīng)的mRNA結(jié)果圖。圖3b為C0X-2/GAPDH的強度值,圖3c為??TNF-a/GAPDH的強度值。圖3d為免疫熒光結(jié)果圖,紅色熒光標(biāo)記的蛋白為??30??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Role of the Wnt/β-catenin pathway in gastric cancer: An indepth literature review[J]. Miguel Angel Chiurillo. World Journal of Experimental Medicine. 2015(02)
本文編號:3251486
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