調(diào)控膠質(zhì)瘤增殖遷移和惡性進(jìn)展關(guān)鍵蛋白的研究探索
發(fā)布時間:2021-06-26 02:42
本論文分為兩大部分:第一部分:Notch1與PKC ζ在膠質(zhì)瘤中表達(dá)相關(guān)并參與膠質(zhì)瘤進(jìn)展第二部分:ITSN1-S的SH3結(jié)構(gòu)域調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和運(yùn)動第一部分目的前期研究表明Notch1-MMP和PKCζ-MMP信號通路調(diào)控腫瘤的惡性進(jìn)展,此外,這兩種通路均參與腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲。但是,在人腦膠質(zhì)瘤中有關(guān)Notch1-MMP和PKCζ-MMP信號通路的相互作用尚未見報(bào)道。因此,本文旨在探討膠質(zhì)瘤中Notch1、PKC ζ、MMP2和MMP9表達(dá)的意義以及四種蛋白表達(dá)的相關(guān)性,進(jìn)而揭示Notch1信號通路和PKC ζ信號通路在膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展中的潛在作用。方法1.收集我院103例膠質(zhì)瘤標(biāo)本,整理臨床病例資料,并對入選患者進(jìn)行隨訪。2.選取的膠質(zhì)瘤級別Ⅰ-ⅣV級,通過免疫組織化學(xué)的方法染色,染色指標(biāo)為Notch1、PKCζ、MMP2 和 MMP9。3.觀察Notch1、PKC ζ、MMP2和MMP9在癌旁組織及膠質(zhì)瘤中表達(dá)差異。4.利用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析四個蛋白及各病理參數(shù)之間的相關(guān)性。5.結(jié)合臨床病理指標(biāo)探討它們在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及對臨床預(yù)后的影響。結(jié)果1.Notch1和PK...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖4膠質(zhì)瘤患者總生存(overall?survival,OS)的Kaplan-Meier生存曲線
出現(xiàn)約4.4、7.4kb條帶;空載體經(jīng)Nhel和EcoRI雙酶切,只出現(xiàn)約7.4kb??條帶。三種質(zhì)粒鑒定結(jié)果都與預(yù)期相符,測序結(jié)果與各質(zhì)粒序列一致,表明實(shí)??驗(yàn)組目的基因已插入載體中(圖2)。??EH1-EH2-CC?ITSN1-S?空載體?DNA??片段全長對照?marker??7..??4.4kb?一‘?二二??2.3kb??圖2三種重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定結(jié)果??43??
ITSN1-S全長組細(xì)胞中有外源ITSN1-S的表達(dá),而空載體對照組和EH1-EH2-CC??片段組沒有表達(dá);EH1-EH2-CC片段組細(xì)胞中有外源EH1-EH2-CC的表達(dá),而??空載體對照組和ITSN1-S全長組沒有表達(dá)(圖3)。??EH1-EH2-CC?ITSK1-S?空載體????片段組?全長組?對照組??外-源?ITSMi-S?^ ̄16〇KDa??內(nèi)源ITSN1-S?、1丨丨丨.』__1?』」丨…1丨丨丨丨rnmmmm?_____?一?1.4〇KDa??外源?EHl?-EH2-CC?mmmmmm?^—?S4KDa??P?-actiri?mmmmmmmrnm?mmmmmm?^——43?KDa??圖3?Western?blotting檢測三種蛋白在LN229細(xì)胞中的表達(dá)情況??2.?2.?4過表達(dá)ITSN1-S全長和EH1-EH2-CC片段后對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響??MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從第3天開始ITSN1-S全長組細(xì)胞明顯表現(xiàn)出較強(qiáng)的??增殖趨勢;第5天時,ITSN1-S全長組細(xì)胞與EH1-EH2-CC片段組和空載體對??照組細(xì)胞增殖率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05);第6天時,ITSN1-S全長組、??EH1-EH2-CC片段組和空載體對照組細(xì)胞增值率分別為(523.60?±?32.12)%、??(409.54?±?31.33)%和(353.89?±?13.98)%。與?EH1-EH2-CC?片段組和空載體對照組??比較
本文編號:3250465
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖4膠質(zhì)瘤患者總生存(overall?survival,OS)的Kaplan-Meier生存曲線
出現(xiàn)約4.4、7.4kb條帶;空載體經(jīng)Nhel和EcoRI雙酶切,只出現(xiàn)約7.4kb??條帶。三種質(zhì)粒鑒定結(jié)果都與預(yù)期相符,測序結(jié)果與各質(zhì)粒序列一致,表明實(shí)??驗(yàn)組目的基因已插入載體中(圖2)。??EH1-EH2-CC?ITSN1-S?空載體?DNA??片段全長對照?marker??7..??4.4kb?一‘?二二??2.3kb??圖2三種重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定結(jié)果??43??
ITSN1-S全長組細(xì)胞中有外源ITSN1-S的表達(dá),而空載體對照組和EH1-EH2-CC??片段組沒有表達(dá);EH1-EH2-CC片段組細(xì)胞中有外源EH1-EH2-CC的表達(dá),而??空載體對照組和ITSN1-S全長組沒有表達(dá)(圖3)。??EH1-EH2-CC?ITSK1-S?空載體????片段組?全長組?對照組??外-源?ITSMi-S?^ ̄16〇KDa??內(nèi)源ITSN1-S?、1丨丨丨.』__1?』」丨…1丨丨丨丨rnmmmm?_____?一?1.4〇KDa??外源?EHl?-EH2-CC?mmmmmm?^—?S4KDa??P?-actiri?mmmmmmmrnm?mmmmmm?^——43?KDa??圖3?Western?blotting檢測三種蛋白在LN229細(xì)胞中的表達(dá)情況??2.?2.?4過表達(dá)ITSN1-S全長和EH1-EH2-CC片段后對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響??MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從第3天開始ITSN1-S全長組細(xì)胞明顯表現(xiàn)出較強(qiáng)的??增殖趨勢;第5天時,ITSN1-S全長組細(xì)胞與EH1-EH2-CC片段組和空載體對??照組細(xì)胞增殖率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05);第6天時,ITSN1-S全長組、??EH1-EH2-CC片段組和空載體對照組細(xì)胞增值率分別為(523.60?±?32.12)%、??(409.54?±?31.33)%和(353.89?±?13.98)%。與?EH1-EH2-CC?片段組和空載體對照組??比較
本文編號:3250465
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