目的：研究UCH-L1對惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞缺氧適應(yīng)性的影響并初步探討其可能的分子機(jī)制。方法：我們使用UCH-L1siRNA靶向抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251和T98G中UCH-L1的表達(dá)。在缺氧環(huán)境下，1)采用劃痕法、Matrigel法分別檢測惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力的變化；2)采用臺盼藍(lán)、克隆集落實(shí)驗(yàn)檢測惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的存活和增殖能力的變化；3)采用乳酸和葡萄糖試劑盒檢測惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞糖酵解能力的變化；4)用Western Blot法檢測缺氧情況下UCH-L1對凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)和HIF-1α表達(dá)調(diào)控的影響。結(jié)果：1)劃痕法和Matrigel法結(jié)果表明在缺氧環(huán)境下沉默UCH-L1后膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251和T98G的遷移能力、侵襲能力明顯下降，提示UCH-L1能促進(jìn)惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和遷移；2)臺盼藍(lán)、克隆集落實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在缺氧環(huán)境下沉默UCH-L1后惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251和T98G的存活和增殖能力明顯減弱，提示UCH-L1有助于惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞缺氧環(huán)境下的增殖和存活；3)在缺氧環(huán)境下沉默UCH-L1后惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞相關(guān)凋亡蛋白Caspase3、PARP的表達(dá)明顯增加，提示UCH-L1能抑制... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
材料與方法
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
        1 細(xì)胞株
        2 主要試劑
        3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4 溶液配制
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
        1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2 siRNA 的設(shè)計(jì)和合成
        3 靶向 UCH-L1 siRNA：
        4 劃痕法
        5 Matrigel 法
        6 臺盼藍(lán)法
        7 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)
        8 乳酸分泌量測定
        9 葡萄糖攝取量測定
        10 細(xì)胞增殖能力檢測
        11 Western Blot 法檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)
        12 免疫組化檢測
        13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
創(chuàng)新點(diǎn)
英文縮略詞表
攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3234010