背景和目的：腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,因其浸潤性生長且容易復(fù)發(fā),手術(shù)、放療、化療等治療措施療效均不十分理想。理論上講腫瘤的發(fā)生涉及多種癌基因和抑癌基因的突變,因此,闡明其分子生物學(xué)發(fā)病機(jī)理、尋求最新的生物學(xué)標(biāo)記物及治療靶標(biāo)以提高療效已成為當(dāng)前的重大課題。近來發(fā)現(xiàn)rf2介導(dǎo)的細(xì)胞能量代謝在腫瘤細(xì)胞的增殖中起著重要作用,本課題旨在以惡性程度較高的U87細(xì)胞為模型,初步探討Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及對化療藥物敏感性中的作用。方法：（1）用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87中的表達(dá)量；（2）設(shè)計(jì)并合成能特異性針對Nrf2基因的反義寡核苷酸片段及對照,用脂質(zhì)體將反義寡核苷酸片段轉(zhuǎn)染U87細(xì)胞,westernblot實(shí)驗(yàn)檢測干擾效果,MTS試驗(yàn)觀察Nrf2干擾后細(xì)胞的增殖能力及對化療藥物替尼泊甙（VM-26）敏感性的影響；（3）實(shí)時(shí)熒光定量PCR和western blot檢測Nrf2干擾后G6PD、PGD及TKT的表達(dá)情況；（4）設(shè)計(jì)并合成特異性針對G6PD和TKT的反義寡核苷酸片段,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染U87細(xì)胞后,Western blot檢測G6PD和TKT的蛋白表... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞系及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        2.1.2 實(shí)時(shí)定量PCR相關(guān)試劑
        2.1.3 Western blotting試劑
        2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.5 試劑的配制
    2.2 方法
        2.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代、凍存
        2.2.2 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 細(xì)胞藥物敏感性實(shí)驗(yàn)(MTS試驗(yàn))
        2.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR,qRT-PCR)
        2.2.5 設(shè)計(jì)購買siRNA
        2.2.6 siRNA干擾實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 Western blot
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的表達(dá)量較高
    3.2 下調(diào)Nrf2的表達(dá)能抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖并增加藥物敏感性
    3.3 下調(diào)Nrf2的表達(dá)能抑制G6PD、PGD和TKT的表達(dá)
    3.4 下調(diào)G6PD和TKT的表達(dá)能抑制U87細(xì)胞的增殖,并增加化療敏感性
4 討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3227664