斑馬魚（Danio rerio）為鯉科、短擔(dān)尼魚屬的小型硬骨魚，對(duì)相當(dāng)一部分化學(xué)污染物敏感，是國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISD）以及國家環(huán)境保護(hù)局推薦作為毒理學(xué)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)魚類模式動(dòng)物。隨著斑馬魚基因組測(cè)序工程的完成，發(fā)現(xiàn)斑馬魚的基因與人類的基因具有高度同源性，使得斑馬魚作為一種研究人類疾病的模式動(dòng)物越來越受到人們的關(guān)注。帕金森�。≒D）是是目前世界第二大神經(jīng)變性疾病，在65歲以上老年人中患病率高達(dá)1%。但目前其致病機(jī)理尚未完全掌握，該病仍不能完全治愈，因此對(duì)PD動(dòng)物模型的研究有助于其致病機(jī)理和治療策略的認(rèn)識(shí)加深。本研究以斑馬魚幼魚和成魚為研究對(duì)象，利用氟哌啶醇誘導(dǎo)斑馬魚PD模型，并探討了南極磷蝦油對(duì)斑馬魚成魚PD模型的神經(jīng)保護(hù)作用。首先考察了氟哌啶醇對(duì)斑馬魚胚胎及幼魚的神經(jīng)毒性，初步確定了氟哌啶醇誘導(dǎo)斑馬魚PD的可行性；之后進(jìn)行了氟哌啶醇對(duì)成年斑馬魚急性毒性及病理組織學(xué)研究，以比較斑馬魚幼魚與成魚建立PD的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)確定成年斑馬魚PD氟哌啶醇劑量；最后探討了南極磷蝦油對(duì)斑馬魚成魚PD模型的神經(jīng)保護(hù)作用。收集斑馬魚受精卵，于6孔培養(yǎng)板中分組處理。由于氟哌啶醇微溶于水，實(shí)驗(yàn)采用0.01%DMSO助溶... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 斑馬魚概述
        1.1 斑馬魚生物學(xué)特性
        1.2 斑馬魚在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用
        1.3 斑馬魚在人類疾病研究中的應(yīng)用
            1.3.1 造血系統(tǒng)疾病
            1.3.2 心血管疾病
            1.3.3 腎臟疾病
            1.3.4 神經(jīng)系統(tǒng)疾病
    2 帕金森病研究概述
        2.1 PD 的神經(jīng)化學(xué)和神經(jīng)病理學(xué)特征
        2.2 PD 的致病機(jī)理
            2.2.1 蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊與聚集
            2.2.2 線粒體功能障礙和氧化應(yīng)激性
            2.2.3 遺傳因素
        2.3 已經(jīng)建立的 PD 動(dòng)物模型
            2.3.1 毒素基礎(chǔ)模型
            2.3.2 基因基礎(chǔ)模型
            2.3.3 神經(jīng)類藥物可逆模型
        2.4 斑馬魚 PD 研究
    3 氟哌啶醇概述
    4 南極磷蝦油
    5 立題依據(jù)與未來展望
第二章 氟哌啶醇對(duì)斑馬魚胚胎及幼魚的神經(jīng)毒性研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 斑馬魚胚胎染毒處理及孵化率、畸變率和死亡率的觀察
        2.2 7 dpf 斑馬魚幼魚游泳行為測(cè)試
        2.3 免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè) 96 hpf 斑馬魚 DA 神經(jīng)元面積
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Hal 對(duì)斑馬魚胚胎孵化率、死亡率和畸變率的影響
        3.2 Hal 對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育形態(tài)影響
        3.3 Hal 對(duì) 7 dpf 斑馬魚幼魚游泳行為的影響
        3.4 Hal 對(duì)斑馬魚幼魚 DA 能神經(jīng)元的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 氟哌啶醇對(duì)成年斑馬魚急性毒性及組織病理學(xué)研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 預(yù)備實(shí)驗(yàn)
        2.2 正式實(shí)驗(yàn)
        2.3 腦部及內(nèi)臟組織學(xué)形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)變化
            2.3.1 固定和洗滌
            2.3.2 乙醇脫水
            2.3.3 透明
            2.3.4 浸蠟
            2.3.5 包埋
            2.3.6 切片、展片與貼片
            2.3.7 HE 染色
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 預(yù)實(shí)驗(yàn)確定正式實(shí)驗(yàn)氟哌啶醇濃度
        3.2 正式實(shí)驗(yàn)斑馬魚急性毒性結(jié)果
            3.2.1 急性毒性實(shí)驗(yàn)斑馬魚行為學(xué)表現(xiàn)
            3.2.2 斑馬魚對(duì)氟哌啶醇 48 h 和 96 h LC5038
        3.3 氟哌啶醇對(duì)斑馬魚組織器官的影響
            3.3.1 腦
            3.3.2 肝臟
            3.3.3 腎臟
    4 討論
    5 小結(jié)
第四章 南極磷蝦油對(duì)斑馬魚帕金森病的神經(jīng)保護(hù)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        1.1 動(dòng)物
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 斑馬魚的分組處理
        2.2 游泳能力測(cè)試
        2.3 呼吸情況和皮膚顏色變化
        2.4 成年斑馬魚免疫組化染色技術(shù)
            2.4.1 常規(guī)石蠟切片制作
            2.4.2 免疫組化染色
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 游泳能力比較
        3.2 呼吸情況變化
        3.3 皮膚顏色變化
        3.4 多巴胺神經(jīng)元變化
    4 討論
    5 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果



本文編號(hào)：3220113