發(fā)布時間：2021-05-24 03:22

　　MicroRNAs是一類由21～25個核苷酸構(gòu)成的內(nèi)源性非編碼單鏈小分子RNA，在生命個體凋亡，增殖，生長發(fā)育和分化等方面發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。已有結(jié)論證實，MicroRNAs在人類的腫瘤中可以扮演原癌基因或者抑癌基因的角色。MET mRNA編碼的細胞跨膜蛋白是一類酪氨酸激酶受體，配體是肝細胞生長因子。當腫瘤細胞MET受體活化時，可以引起腫瘤細胞的的惡性程度增強，抑制腫瘤細胞凋亡。以上協(xié)同作用促進了腫瘤細胞的侵襲性生長。既往的腫瘤（包括膠質(zhì)瘤）研究結(jié)論證實，MET基因表達和正常組織存在明顯差異。應(yīng)用計算機技術(shù)和表達分析，確定miR-410的序列和MET mRNA3’UTR部分序列相匹配。前期獲得的人類膠質(zhì)瘤標本檢測也證實miR-410和MET表達量呈現(xiàn)負相關(guān)性。在膠質(zhì)瘤中，熒光素酶和蛋白分析證實miR-410直接靶向作用于MET。miR-410表達量升高時，明顯抑制腫瘤細胞的增殖和侵襲。在此基礎(chǔ)上，還證實miR-410發(fā)揮作用機制主要是通過影響了MET誘導(dǎo)的AKT信號通路。miR-410靶向作用于MET和MET沉默及被敲除后發(fā)揮的作用類似。miR-410主要是直接靶向作用于原癌基因MET... 

【文章來源】：哈爾濱醫(yī)科大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1. 文獻綜述
2. 前言
3、miR-410 靶向作用 MET 對膠質(zhì)瘤增殖和侵襲的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
            3.1.1.1 人類膠質(zhì)瘤標本
            3.1.1.2 膠質(zhì)瘤細胞系
            3.1.1.3 實驗動物
            3.1.1.4 所需試劑
            3.1.1.5 主要儀器
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 腫瘤細胞系培養(yǎng)
            3.1.2.2 細胞轉(zhuǎn)染
            3.1.2.3 總 RNA 提取
            3.1.2.4 RT-Real time PCR 檢測 miR-410
            3.1.2.5 原位雜交法檢測 miRNA-410
            3.1.2.6 miRNA-410 的生物學(xué)分析
            3.1.2.7 平板克隆法分析細胞增殖活性
            3.1.2.8 流式細胞儀檢測細胞周期
            3.1.2.9 Transwell 實驗檢測腫瘤細胞的侵襲能力
            3.1.2.10 熒光素酶報告載體的構(gòu)建
            3.1.2.11 熒光素酶真核表達載體的構(gòu)建
            3.1.2.12 Western blot 檢測蛋白的變化
            3.1.2.13 體內(nèi)試驗部分
            3.1.2.14 免疫組織化學(xué)檢測
            3.1.2.15 統(tǒng)計學(xué)處理
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
4、RANK 蛋白對破骨細胞活性的影響
    4.1 材料和方法
    4.2 結(jié)果
    4.3 討論
5、結(jié)論
6、致謝
7、參考文獻
8、個人簡歷
9、附圖



本文編號：3203457