背景：作為最常見的神經(jīng)上皮性腫瘤,星形細(xì)胞瘤通常具有無限增殖和侵襲性生長(zhǎng)的特點(diǎn),盡管目前已有多種治療手段,但該病的整體預(yù)后仍欠佳,因而仍有必要深入研究其腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制以尋找新的有效治療靶點(diǎn)。p38γ是p38MAPK（絲裂原活化蛋白激酶）的四個(gè)亞型之一,正常情況下僅表達(dá)于骨骼肌組織。近年來的一些研究發(fā)現(xiàn)p38γ可能參與一些潛在的細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的調(diào)節(jié)過程,表明其在腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展過程中潛在的致瘤性,但具體作用機(jī)制仍然不明。目前國(guó)內(nèi)外尚未有研究揭示p38γ在人腦星形細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)情況及其對(duì)腫瘤生物學(xué)行為的影響。目的：探討p38γ在人腦星形細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)情況及與各項(xiàng)臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。構(gòu)建沉默人p38γ基因表達(dá)的siRNA序列并篩選出有效siRNA序列,為后續(xù)體外實(shí)驗(yàn)研究p38γ的生物學(xué)功能提供基礎(chǔ)。探討p38γ對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、侵襲等多種生物學(xué)特性的影響及相關(guān)的作用機(jī)制。方法：標(biāo)準(zhǔn)化采集61例人星形細(xì)胞瘤和5例非腫瘤性腦組織標(biāo)本,分別用Western blot及免疫組化法檢測(cè)前述標(biāo)本中p38γ和hTERT蛋白的表達(dá)差異,分析p38γ表達(dá)水平與星形細(xì)胞瘤患者各項(xiàng)臨床病... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
    1.研究背景
    2.主要研究思路和研究?jī)?nèi)容
第一部分：p38γ在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
    前言
    第一章 Western blot檢測(cè)p38γ蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
        材料與方法
            1. 研究對(duì)象
            2. 主要實(shí)驗(yàn)器材及試劑
            3. 實(shí)驗(yàn)方法
            4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            1. Western blot檢測(cè)p38γ及hTERT蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
            2. 人腦星形細(xì)胞瘤中p38γ蛋白的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系
    第二章 免疫組化檢測(cè)p38γ蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
        材料與方法
            1. 研究對(duì)象與分組
            2. 主要實(shí)驗(yàn)器材及試劑
            3. 實(shí)驗(yàn)方法
            4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            1. 人腦星形細(xì)胞瘤常規(guī)病理組織學(xué)結(jié)果
            2. 免疫組化檢測(cè)p38γ及hTERT蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
    討論
    小結(jié)
第二部分：p38γ基因siRNA的構(gòu)建及有效靶點(diǎn)篩選
    前言
    材料與方法
        1. 主要實(shí)驗(yàn)器材及試劑
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
        3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    結(jié)果
        1. p38γ蛋白在人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株中的表達(dá)
        2. 倒置熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率
        3. 熒光定量Real time-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后p38γ mRNA的變化
        4. siRNA在翻譯水平抑制人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞p38γ蛋白的表達(dá)
    討論
    小結(jié)
第三部分：siRNA沉默p38γ基因?qū)251細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及相關(guān)機(jī)制
    前言
    第一章 siRNA沉默p38γ基因?qū)251細(xì)胞增殖、凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制
        材料與方法
            1. 主要實(shí)驗(yàn)器材及試劑
            2. 實(shí)驗(yàn)方法
            3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            1. CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力
            2. 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
            3. 端粒酶活性檢測(cè)(TRAP-PCR銀染法)
            4. hTERT蛋白表達(dá)檢測(cè)(Western Blot)
            5. Caspase-3/-9酶活性檢測(cè)
    第二章 siRNA沉默p38γ基因?qū)251細(xì)胞遷移、侵襲的影響及相關(guān)機(jī)制
        材料與方法
            1. 主要實(shí)驗(yàn)材料及試劑
            2. 實(shí)驗(yàn)方法
            3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        結(jié)果
            1. 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
            2. 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
            3. 細(xì)胞骨架免疫熒光染色
            4. Western Blot檢測(cè)MMP-2/-9蛋白表達(dá)
    討論
    小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
本課題的創(chuàng)新點(diǎn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間主要的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3189504