背景：作為最常見的神經(jīng)上皮性腫瘤,星形細胞瘤通常具有無限增殖和侵襲性生長的特點,盡管目前已有多種治療手段,但該病的整體預(yù)后仍欠佳,因而仍有必要深入研究其腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制以尋找新的有效治療靶點。p38γ是p38MAPK（絲裂原活化蛋白激酶）的四個亞型之一,正常情況下僅表達于骨骼肌組織。近年來的一些研究發(fā)現(xiàn)p38γ可能參與一些潛在的細胞惡性轉(zhuǎn)化的調(diào)節(jié)過程,表明其在腫瘤的發(fā)生和進展過程中潛在的致瘤性,但具體作用機制仍然不明。目前國內(nèi)外尚未有研究揭示p38γ在人腦星形細胞瘤組織中的表達情況及其對腫瘤生物學(xué)行為的影響。目的：探討p38γ在人腦星形細胞瘤組織中的表達情況及與各項臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。構(gòu)建沉默人p38γ基因表達的siRNA序列并篩選出有效siRNA序列,為后續(xù)體外實驗研究p38γ的生物學(xué)功能提供基礎(chǔ)。探討p38γ對膠質(zhì)瘤細胞增殖、凋亡、遷移、侵襲等多種生物學(xué)特性的影響及相關(guān)的作用機制。方法：標(biāo)準化采集61例人星形細胞瘤和5例非腫瘤性腦組織標(biāo)本,分別用Western blot及免疫組化法檢測前述標(biāo)本中p38γ和hTERT蛋白的表達差異,分析p38γ表達水平與星形細胞瘤患者各項臨床病... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
    1.研究背景
    2.主要研究思路和研究內(nèi)容
第一部分：p38γ在人腦星形細胞瘤中的表達
    前言
    第一章 Western blot檢測p38γ蛋白在人腦星形細胞瘤中的表達
        材料與方法
            1. 研究對象
            2. 主要實驗器材及試劑
            3. 實驗方法
            4. 統(tǒng)計學(xué)分析
        結(jié)果
            1. Western blot檢測p38γ及hTERT蛋白在人腦星形細胞瘤中的表達
            2. 人腦星形細胞瘤中p38γ蛋白的表達與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系
    第二章 免疫組化檢測p38γ蛋白在人腦星形細胞瘤中的表達
        材料與方法
            1. 研究對象與分組
            2. 主要實驗器材及試劑
            3. 實驗方法
            4. 統(tǒng)計學(xué)分析
        結(jié)果
            1. 人腦星形細胞瘤常規(guī)病理組織學(xué)結(jié)果
            2. 免疫組化檢測p38γ及hTERT蛋白在人腦星形細胞瘤中的表達
    討論
    小結(jié)
第二部分：p38γ基因siRNA的構(gòu)建及有效靶點篩選
    前言
    材料與方法
        1. 主要實驗器材及試劑
        2. 實驗方法
        3. 統(tǒng)計學(xué)分析
    結(jié)果
        1. p38γ蛋白在人膠質(zhì)瘤U251細胞株中的表達
        2. 倒置熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率
        3. 熒光定量Real time-PCR檢測轉(zhuǎn)染后p38γ mRNA的變化
        4. siRNA在翻譯水平抑制人膠質(zhì)瘤U251細胞p38γ蛋白的表達
    討論
    小結(jié)
第三部分：siRNA沉默p38γ基因?qū)251細胞生物學(xué)行為的影響及相關(guān)機制
    前言
    第一章 siRNA沉默p38γ基因?qū)251細胞增殖、凋亡的影響及相關(guān)機制
        材料與方法
            1. 主要實驗器材及試劑
            2. 實驗方法
            3. 統(tǒng)計學(xué)分析
        結(jié)果
            1. CCK-8法檢測細胞增殖活力
            2. 細胞凋亡檢測
            3. 端粒酶活性檢測(TRAP-PCR銀染法)
            4. hTERT蛋白表達檢測(Western Blot)
            5. Caspase-3/-9酶活性檢測
    第二章 siRNA沉默p38γ基因?qū)251細胞遷移、侵襲的影響及相關(guān)機制
        材料與方法
            1. 主要實驗材料及試劑
            2. 實驗方法
            3. 統(tǒng)計學(xué)分析
        結(jié)果
            1. 細胞遷移實驗
            2. 細胞侵襲實驗
            3. 細胞骨架免疫熒光染色
            4. Western Blot檢測MMP-2/-9蛋白表達
    討論
    小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻
本課題的創(chuàng)新點
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間主要的研究成果
致謝



本文編號：3189504