發(fā)布時(shí)間：2021-05-16 07:11

　　第一部分scFvCD20負(fù)載antagomiR155的構(gòu)建及其對(duì)電鰻AchR刺激C57BL/6小鼠B細(xì)胞的影響目的：構(gòu)建scFvCD20單鏈抗體并負(fù)載antagomiR155,觀察其對(duì)電鰻AchR刺激C57BL/6小鼠B細(xì)胞增殖、成熟及抗AchR特異性抗體分泌的影響。方法：根據(jù)Genebank小鼠CD20基因信息,設(shè)計(jì)末端帶有半胱氨酸殘基的小鼠CD20單鏈抗體即scFvCD20cys,通過(guò)商品化偶聯(lián)肽段cys-9R與miR155拮抗劑即antagomiR155偶聯(lián),同時(shí)針對(duì)antagomiR155設(shè)計(jì)對(duì)照antagomiRNA;免疫磁珠分選小鼠脾臟T細(xì)胞和B細(xì)胞,首先在B細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入FITC標(biāo)記的scFvCD20偶聯(lián)的antagomiR155,培養(yǎng)后流式檢測(cè)B細(xì)胞對(duì)其攝取率,熒光定量PCR檢測(cè)B細(xì)胞miR155的表達(dá)水平；驗(yàn)證其有效性；然后將分選的小鼠脾臟T細(xì)胞和B細(xì)胞按照1：3的比例共培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入電鰻AchR（Torpedo AchR, T-AchR）,分為空白組、實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,在實(shí)驗(yàn)組中加入scFvCD20偶聯(lián)的antagomiR155,而在對(duì)照組中加入對(duì)照anta... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：126 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 SCFVCD20負(fù)載ANTAGOMIR155的構(gòu)建及其對(duì)電鰻ACHR刺激C57BL/6小鼠B細(xì)胞的影響
    技術(shù)路線
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 SCFVCD20負(fù)載ANTAGOMIR155治療EAMG的療效觀察
    技術(shù)路線
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)流程
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 MIR155在MG患者PBMCS中的表達(dá)研究
    技術(shù)路線
    1 研究對(duì)象
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Small but influential:the role of microRNAs on gene regulatory network and 3′UTR evolution[J]. Rui Zhang a, b, Bing Su a, a State Key Laboratory of Genetic Resources and Evolution, Kunming Institute of Zoology and Kunming Primate Research Center, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650223, China b Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China.  遺傳學(xué)報(bào). 2009(01)



本文編號(hào)：3189230