神經(jīng)管畸形（Neural tube defects,NTDs）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的先天畸形,全世界范圍內(nèi)的發(fā)病率為0.05%-0.2%,嚴重影響患兒的生理發(fā)育和生活質(zhì)量,其發(fā)生機制尚未闡明。研究發(fā)現(xiàn),肌醇（Inositol）是維生素B族物質(zhì),參與了人體許多重要物質(zhì)的合成和代謝,在胚胎發(fā)育,尤其是神經(jīng)管發(fā)育過程中至關(guān)重要,與NTDs的發(fā)生密切相關(guān)。在前期已建立的人類NTDs樣本庫及血漿肌醇檢測方法-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）基礎(chǔ)上,隨機選出NTDs胎兒及正常胎兒樣本作為實驗組及對照組。利用蛋白質(zhì)芯片技術(shù)及生物信息學(xué)方法對兩組神經(jīng)組織蛋白質(zhì)磷酸化的水平進行檢測,篩選出72個磷酸化水平差異顯著的蛋白,經(jīng)KEGG分析,覆蓋了56個pathway,其中PI3K/Akt信號通路相關(guān)蛋白磷酸化水平變化顯著。為進一步研究肌醇代謝紊亂是否經(jīng)PI3K/Akt信號通路影響NTDs發(fā)生,本課題在已建立的肌醇代謝紊亂NTDs小鼠動物模型基礎(chǔ)上,收集NTDs和正常小鼠胚胎及母體血樣、組織樣本,采用體視顯微鏡及蘇木精-伊紅染色法（HE染色）方法判定小鼠胚胎表型的正常與否,利用實時熒光定量（Real-ti... 

【文章來源】：北京工業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 神經(jīng)管畸形概述
        1.1.1 神經(jīng)管畸形的危害
        1.1.2 神經(jīng)管的形成及影響因素
        1.1.3 細胞的增殖、凋亡與NTDs
    1.2 肌醇缺乏與NTDs
        1.2.1 肌醇缺乏與神經(jīng)管發(fā)育
        1.2.2 肌醇與PI3K/Akt信號通路
        1.2.3 肌醇與GSK3β
    1.3 本課題的研究內(nèi)容
        1.3.1 研究目標
        1.3.2 研究內(nèi)容
第2章 人群神經(jīng)組織樣本蛋白質(zhì)磷酸化水平檢測
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 人類NTDs臨床樣本的篩選
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 實驗試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 樣品蛋白質(zhì)抽提和標記
        2.3.2 芯片雜交與清洗
        2.3.3 芯片掃描
        2.3.4 質(zhì)控分析
        2.3.5 數(shù)據(jù)分析
    2.4 芯片實驗結(jié)果與討論
        2.4.1 蛋白質(zhì)標準曲線的制作
        2.4.2 蛋白質(zhì)芯片質(zhì)量控制結(jié)果
        2.4.3 蛋白質(zhì)芯片生物信息學(xué)分析
    2.5 本章小結(jié)
第3章 肌醇代謝失衡NTDs小鼠模型驗證
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 實驗動物來源及飼養(yǎng)
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 實驗試劑
        3.2.4 溶液配制
    3.3 實驗方法
        3.3.1 肌醇缺乏動物模型及組織樣本收集
        3.3.2 組織病理檢測
        3.3.3 RT-PCR檢測
        3.3.4 Western blotting檢測
        3.3.5 統(tǒng)計分析
    3.4 實驗結(jié)果與討論
        3.4.1 肌醇代謝障礙對胚胎神經(jīng)管發(fā)育的影響
        3.4.2 肌醇代謝障礙對PI3K/Akt通路的影響
        3.4.3 PI3K/Akt通路相關(guān)基因RT-PCR檢測結(jié)果
    3.5 本章小結(jié)
第4章 肌醇代謝失衡細胞模型驗證
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗儀器
        4.2.3 實驗試劑
    4.3 實驗方法
        4.3.1 細胞處理
        4.3.2 測定細胞周期
        4.3.3 測定細胞凋亡
        4.3.4 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.4 實驗結(jié)果與討論
        4.4.1 低肌醇狀態(tài)對細胞周期的影響
        4.4.2 低肌醇狀態(tài)對細胞凋亡的影響
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3180285